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目的:课题组前期采用蛋白质组学技术,从敲低STGC3基因表达的人鼻咽永生化上皮细胞NP69,筛选鉴定出83个差异表达蛋白质分子,本研究从中挑选高表达蛋白质膜粘蛋白3(annexin A3ANXA3)及低表达蛋白质尼克酰胺转移酶(nicotinamide N-methyltransferase NNMT),进行实验验证,并分析ANXA3和NNMT蛋白质在鼻咽癌细胞及组织中表达的意义,探讨ANXA3和NNMT表达与STGC3基因的关系,为阐明STGC3基因在鼻咽癌发生发展中的作用提供实验依据。方法:采用RT-PCR和Western-blot技术,检测ANXA3和NNMT在敲低STGC3表达的NP69细胞系、鼻咽癌CNE1和CNE2细胞系及鼻咽癌组织中的表达;免疫组织化学染色,检测ANXA3和NNMT在鼻咽癌组织中的表达,分析ANXA3和NNMT表达与STGC3的关系及意义。结果:RT-PCR结果显示:在STGC3低表达的NP69细胞(PRNAT-U6/shRNA-STGC3-NP69)、鼻咽癌CNE1及CNE2细胞、鼻咽癌组织均存在ANXA3基因mRNA表达水平增高,分别与细胞对照组(NP69细胞)和组织对照组(非鼻咽癌组织)比较,差异具有统计学意义(p<0.05);而NNMT基因的表达降低,与对照组间差异具有统计学意义(p<0.05);灰度扫描,计算相对表达量,ANXA3基因:NP69细胞0.366±0.036、STGC3低表达NP69细胞0.727±0.031、CNE1细胞0.737±0.051、CNE2细胞0.754±0.031、非鼻咽癌组0.358±0.015、鼻咽癌组0.667±0.031;NNMT基因:NP69细胞0.670±0.022、STGC3低表达NP69细胞0.362±0.055、CNE1细胞0.335±0.026、CNE2细胞0.375±0.042、非鼻咽癌组0.783±0.090、鼻咽癌组0.329±0.054。Western-blot结果与RT-PCR检测结果一致:低表达STGC3的NP69细胞、鼻咽癌CNE1及CNE2细胞、鼻咽癌组织均存在ANXA3蛋白表达高表达,与对照组间差异具有显著意义(P<0.05);而各实验组均显示NNMT蛋白表达降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);经灰度扫描,计算相对表达量,ANXA3蛋白:NP69细胞0.530±0.050、STGC3低表达NP69细胞0.916±0.025、CNE1细胞0.856±0.038、CNE2细胞0.928±0.043、非鼻咽癌组织0.560±0.006、鼻咽癌组织0.933±0.031,NNMT蛋白:NP69细胞0.994±0.049、STGC3低表达NP69细胞0.696±0.030、CNE1细胞0.759±0.027、CNE2细胞0.742±0.024、非鼻咽癌组织0.868±0.041、和鼻咽癌组织0.582±0.093。免疫组织化学染色结果显示:ANXA3蛋白表达定位于细胞浆和细胞膜,NNMT蛋白表达定位于细胞浆和细胞核,以细胞浆为主,鼻咽癌组织和对照组非鼻咽癌组织的阳性表达率分别为:ANXA3蛋白83.3%(鼻咽癌10/12)和23.1%(对照组3/13),NNMT蛋白41.6%(鼻咽癌5/12)和84.6%(对照组11/13);鼻咽癌组织中ANXA3蛋白阳性表达率高于组,而NNMT蛋白的阳性表达率则低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:1. ANXA3在敲低STGC3低表达的人鼻咽上皮NP69细胞中表达增高,而NNMT表达降低。2.鼻咽癌细胞CNE1, CNE2和组织中ANXA3表达增高,而NNMT表达降低。