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目的:应用EliVisionTM plus免疫组化染色技术,检测Galectin-3、Fascin-1、β-catenin和CD105蛋白在结直肠腺癌(colorectal carcinoma,CRC)的表达,探讨:(1)Galectin-3、Fascin-1、β-catenin蛋白和微血管密度(microvessel density,MVD)在CRC分化程度、浆膜浸润、淋巴转移以及TNM分期等参数中的意义。(2)Galectin-3、Fascin-1和β-catenin在结直肠正常组织、结直肠腺瘤和CRC中的表达及其临床病理意义。(3)Galectin-3、Fascin-1和β-catenin在CRC中的相互关系。(4)Galectin-3、Fascin-1和β-catenin与MVD在CRC中的关系。
方法:收集251医院病理科2002-2007年的原发性CRC术后标本60例,每例挑选最大肿瘤面积的组织蜡块,以及同期结直肠腺瘤30例,正常组织30例,常规石蜡切片4μm,65-70℃烤片1-1.5小时。微波-枸橼酸纳缓冲液抗原修复、EliVisionTM plus免疫组化染色后光镜观察:(1)CRC中的Galectin-3、Fascin-1、β-catenin阳性率和光密度值(IOD)与此组病人的年龄、肿瘤大小、部位、分化程度和淋巴结转移等的关系。(2)CD105标记的MVD与CRC患者年龄、肿瘤大小、分化程度、浆膜浸润、临床分期和淋巴结转移等的关系。(3)在CRC中Galectin-3、Fascin-1、β-catenin与MVD之间的关系。
结果:1、Galectin-3、Fascin-1、β-catenin蛋白在60例CRC标本中的阳性率分别是68.3%(41/60)、53.3%(32/60)、81.7%(49/60),结直肠腺瘤的阳性率为46.7%(14/30)、30.0%(9/30)、43.3%(13/30),二者存在显著差异(P<0.05),结直肠腺瘤的阳性率显著高于正常组织的表达率(P<0.05)。Galectin-3的表达及β-catenin的异常表达在分化程度、浆膜浸润、淋巴结转移和TNM分期有显著差异(P<0.05),而在性别、年龄及肿瘤大小等临床病理学特征中无明显差异(P>0.05); Fascin-1在浆膜浸润、淋巴结转移(P<0.05)和TNM分期(P<0.01)有显著差异,不同分化程度之间无差异(P>0.05)。
CRC的Galectin-3、Fascin-1、β-catenin阳性细胞的IOD值分别为25.16±5.25、21.34±4.58、28.90±5.50与结直肠腺瘤中Galectin-3、Fascin-1、β-catenin的IOD值差异非常显著(P<0.01);正常组织的IOD值均低于结直肠腺瘤的IOD值,有非常显著差异(P<0.01);三者有淋巴结转移组IOD值(28.64±5.83、24.64±4.36、28.34±6.56)与无淋巴结转移组有显著差异(P<0.05)。而Galectin-3和β-catenin的IOD值在TNM分期、分化程度和有无浆膜浸润中有明显差异(P<0.05、P<0.01);Fascin-1的IOD值与浆膜浸润和TNM分期有明显差异(P<0.05),不同分化程度无明显差异(P>0.05)。
2、CD105标记的平均微血管密度计数为34.53±7.43条,实际范围18-55条。CD105标记的MVD在正常组织、结直肠腺瘤和CRC存在非常显著性差异(P<0.01);与性别、年龄、肿瘤大小及分化程度等临床病理学特征无差异(P>0.05);淋巴结转移和TNM分期有明显差异(P<0.05),而且和肿瘤的浆膜浸润有非常明显差异(P<0.01)。
3、Galectin-3和Fascin-1两者在CRC中阳性表达分别为41例和32例,在Galectin-3阳性表达41例中Fascin-1表达26例,在Galectin-3阴性表达19例中Fascin-1表达6例,经Spearman相关检验,结果显示Galectin-3与Fascin-1两者表达呈正相关(r=0.728,P<0.01)。而Galectin-3阳性表达的41例中β-catenin表达38例,阴性表达的19例中β-catenin表达11例,两者呈正相关(r=0.696,P<0.01)。CRC中49例β-catenin阳性表达,在β-catenin阳性表达例数中Fascin-1表达30例,阴性表达的11例中只有2例表达Fascin-1,呈正相关(r=0.507,P<0.01)。
4、CD105标记的MVD计数随着Galectin-3和β-catenin蛋白的高表达而升高,MVD与Galectin-3、β-catenin之间均有明显相关性(r=0.420,P<0.01; r=0.265,P<0.05)。而CD105标记的MVD计数同样随着Fascin-1蛋白高表达而升高,但二者之间却无相关性(r=0.226,P>0.05)。
结论:1、Galectin-3、Fascin-1、β-catenin的高表达与CRC细胞的癌变、高侵袭能力、淋巴结转移等有一定相关性,可作为潜在预测大肠癌浸润转移的敏感指标。三者可能共同促进CRC细胞增殖、浸润和转移。
2、MVD在淋巴结转移、TNM分期和浆膜浸润有明显差异。提示CD105表达密度增强的病人浸润转移率高、预后差。
3、Galectin-3、Fascin-1、β-catenin蛋白和CD105标记的MVD共同促进CRC浸润转移,可作为预测CRC病人预后的指标。