【摘 要】
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通过将KfPDI的自身启动子更换为酵母S.cerevisiae组成型高表达基因PGK的启动子P,构建KfPDI基因的组成型高表达单元P-PDI,并将其分别插入以URA3和G418为选择标记的酵母游离或
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通过将KfPDI的自身启动子更换为酵母S.cerevisiae组成型高表达基因PGK的启动子P<,PGK>,构建KfPDI基因的组成型高表达单元P<,PGK>-PDI,并将其分别插入以URA3和G418为选择标记的酵母游离或整合表达载体,转化酵母菌株后经筛选得到带有不同拷贝数KfPDI基因的酵母转化子.经原位点杂交和酶活性测定表明这些转化子中的KfPDI基因插贝数与其蛋白二硫化物异构酶表达水平密切相关.选择KfPDI基因拷贝数含量不同的转化子作为宿主,并将干扰素基因表达载体转入其中,观察PDI的过量表达对干扰素表达的影响.
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