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目的:检测膝骨性关节炎(Knee Joint Osteoarthritis,KOA)患者关节滑液中细胞因子IL—1β、IL—6和TNF—α在其不同严重程度及中医证型中的表达,探讨它们的内在关系和特点,为客观化评估KOA病情轻重和中医辨证分型提供科学的临床实验依据。
方法:1、在泸州医学院附属医院、附属中医医院门诊及住院KOA病人中,选择需行膝关节穿刺、冲洗术及关节镜检查且膝关节严重性指数(Index of Severity for Knee Joint Osteoarthritis,ISOA)达5分及以上的KOA患者,由两位具有高级职称的中医医师参照《中药新药临床研究指导原则》2002年版的OA中医证候诊断标准进行辨证分型,分为:A、肝肾不足、筋脉瘀滞证,B、脾肾两虚、湿注骨节证和C、肝肾亏虚、痰瘀交阻证三组。每组随机选择12例患者,同时设立需行膝部手术的非KOA患者6例作为对照组;2、同时根据患者KOA严重性指数(ISOA)进行等级评估,分为:中度严重组(ISOA指数5—7分);严重组(ISOA指数8—10分);非常严重组(ISOA指数11—13分);极严重组(ISOA指数14分及以上)及对照组。3、各组在行膝关节穿刺、冲洗术、关节镜检查及其他相应手术时,抽取一定的关节滑液,采用双抗体夹心Elisa法检测各组中细胞因子IL—1β、IL—6和TNF—α的含量;4、采用SPSS13.0统计软件包进行相关统计,统计数据以均数士标准差(x±s)表示。
结果:1、IL—1β、IL—6、TNF—α在KOA各严重程度组与对照组中的表达:①IL—1β在KOA各严重程度组与对照组中的表达:中度严重组与对照组比较,无统计学意义(P=0.233>0.05);严重组及以上病例组均高于对照组和中度严重组,有统计学意义(P<0.05);非常严重组和极其严重组均高于严重组,有统计学意义(P<0.05);极严重组高于非常严重组,有统计学意义(P<0.05)。IL—1β水平随KOA严重性指数的增加而升高,与关节病变的严重程度呈正相关(r=0.784,P=0.000<0.01);②IL—6在KOA各严重程度组与对照组中的表达:IL—6的水平在病情严重程度相对较轻的患者中也可显著升高,但各严重程度组与对照组比较,无统计学意义(P=0.143>0.05),各严重程度组组间比较,无统计学意义(P>0.05);IL—6与ISOA指数呈零相(r=0.078,P=0.651>0.05);③TNF—α在KOA各严重程度组与对照组中的表达:中度严重组与对照组比较,无统计学意义(P=0.237>0.05);余各病例组与对照组比较,有统计学意义(P<0.05);中度严重与非常严重组、极严重组比较,有统计学意义(P<0.05)。TNF—α水平随KOA严重性指数的增加而升高,含量与关节病变的严重程度呈正相关(r=0.449,P=0.006<0.05)。2、IL—1β、IL—6、TNF—α在KOA各中医证型组与对照组中的表达:①IL—1β在KOA各中医证型组与对照组中的表达:各中医证型组与对照组IL—1β的比较,差异有统计学意义(P<0.05),各证型组之间比较差异无显著性;②IL—6在KOA各中医证型组与对照组中的表达:A组肝肾不足、筋脉瘀滞证与对照组比较,无统计学意义(P>0.05),B组脾肾两虚、湿注骨节证和C组肝肾亏虚、痰瘀交阻证IL—6水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),各证型组之间比较差异无显著性;③TNF—α在KOA各中医证型组与对照组中的表达:各中医证型组与对照组TNF—α的比较,差异有统计学意义(P<0.05),各证型组之间比较差异无显著性。
结论:1、KOA中度严重程度以上患者关节滑液中IL—1β、TNF—α水平随KOA严重性指数的增加而升高。尤其与IL—1β水平的相关性最高,其次为TNF—α,提示关节滑液中IL—1β、TNF—α直接参与了KOA的发病,可以综合运用IL—1β,TNF—α表达水平对KOA患者进行临床分级以及临床治疗效果的评定。2、IL—6表达在KOA早期即可显著升高,但与KOA的严重程度无明显相关性,尚不能以其关节滑液中IL—6的具体水平作为判定关节严重程度的具体指标。3、KOA中医各证型组之间关节滑液内细胞因子的表达差异不显著,故尚不能以其关节滑液内细胞因子IL—1β、IL—6、TNF—α的表达水平情况来对KOA患者进行中医辨证分型。