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背景他克莫司是目前免疫抑制治疗的一线药物,虽疗效明确,但价格昂贵、治疗周期长、个体差异性大。环孢素与他克莫司代谢途径相似,可通过与盐酸小檗碱相互作用升高血药浓度,从而降低其给药剂量,减轻患者的经济负担。研究报道,这主要与环孢素与小檗碱均可影响CYP450酶和P-gp的活性有关。同样作为肝药酶CYP3A及P-gp的底物,他克莫司与盐酸小檗碱是否存在相互作用却鲜有报道,而CYP3A是他克莫司体内的主要代谢酶,CYP3A基因多态性对其给药剂量和浓度影响尚不是很明确,关于对儿童体内药物浓度影响的数据更为缺乏。因此,本课题通过研究盐酸小檗碱对大鼠体内他克莫司药代动力学的影响,探讨盐酸小檗碱与他克莫司是否存在相互作用;通过Meta分析,探讨CYP3A5*1不同基因型对儿科患者他克莫司给药剂量及浓度的影响,分析治疗开始前基因组的检测是否有助于预测个体所需剂量,为临床用药提供参考依据。方法（1）建立LC-MS/MS检测大鼠全血中他克莫司血药浓度的方法,并对所建立的方法进行方法学考察。（2）动物实验:探讨盐酸小檗碱对大鼠体内他克莫司药代动力学的影响。30只健康雄性SD大鼠,随机分为5组,每组6只,以灌胃方式分别进行单次或多次给药。其中,第1组大鼠灌胃他克莫司1次;第2组大鼠持续灌胃他克莫司1周,每日给药2次;第3组大鼠先后灌胃盐酸小檗碱和他克莫司各1次;第4组大鼠持续灌胃他克莫司1周,每日给药2次,在第8天先后灌胃盐酸小檗碱和他克莫司各1次;第5组大鼠持续灌胃他克莫司和盐酸小檗碱1周,每日给药2次,在第8天先后灌胃盐酸小檗碱和他克莫司各1次。以上5组大鼠分别在最后1次他克莫司灌胃给药后0、5、15、30 min和1、2、3、4、6、8、12h从眼眶后静脉丛取血约0.3 mL,置于含肝素的1.5 mL离心管中,于冰箱-80℃保存,待测。利用LC-MS/MS法分别检测5组大鼠血药浓度,应用DAS 2.0软件绘制他克莫司的血药浓度-时间曲线,计算药代动力学参数如达峰时间（Time to reach maximum concentration,tmax）、峰浓度（Maximum plasma concentration,Cmax）、消除半衰期（The apparent elimination half-life,t1/2）、血药浓度-时间曲线下面积（Area under the plasma concentration-time curve,AUC）、清除率（Clearance,CL）和平均滞留时间（Mean residence time,MRT）等参数。数据统计分析均采用SPSS 22.0软件,计量资料均以均值±标准差（Mean±Standard deviation,Mean ± SD）表示。（3）收集CYP3A5*1对小儿移植患者中他克莫司所需剂量、血药浓度和/或浓度--剂量比值（Concentration-to-dose ratio,C/D 比值）的所有相关文献进行系统回顾与Meta分析,探讨CYP3A5*1不同基因型对儿科患者他克莫司给药剂量及浓度的影响。结果（1）他克莫司的色谱峰型良好,空白全血的内源性物质不干扰他克莫司和内标的测定,获得的色谱图具有高度的专属性,符合检测要求;定量范围为0.20-200ng/mL,相关系数R2=0.9991,定量下限为0.2 ng/mL;日内及日间准确度在85%-115%之间、精密度≤15%;提取回收率＞85%;在室温及冻存条件下稳定。（2）动物实验中与第1组相比,第3组大鼠体内的他克莫司药动学参数AUC（0-t）、AUC（0-∞）、MRT（0-t）都有不同程度的下降,并具有统计学意义（P＜0.05）;第1组和第4组比较以及第2组与第4组比较,大鼠体内的他克莫司药动学参数差异均无统计学意义（P＞0.05）;与第2组相比,第5组大鼠体内的他克莫司药动学参数AUC（0-t）有下降趋势,而参数CLz呈现上升趋势,并具有统计学意义（P＜0.05）。（3）通过文献分析发现与非表达者相比,CYP3A5*1表达者中他克莫司血药浓度明显较低,这可能增加他们的器官排斥风险。给予较高的他克莫司剂量（0.06 mg/kg/d）在表达者中可以达到与CYP3A5*1非表达者相同的血药浓度。结论（1）结果表明本研究建立的检测大鼠全血中他克莫司浓度的LC-MS/MS方法学其特异性、灵敏度、准确度、精密度、回收率和稳定性符合国家相关规定,可应用于他克莫司体内的药代动力学研究。（2）本研究结果表明了盐酸小檗碱对大鼠体内的他克莫司药动学有一定的影响。单次给药小檗碱对单次给药他克莫司的药动学影响,主要表现在AUC、MRT参数有所降低,而多次给药小檗碱对多次给药他克莫司时AUC参数有所下降的同时CLz表现上升趋势,这两者联合用药需考虑药物相互作用。（3）器官移植后,仅使用治疗药物监测（Therapeutic drug monitoring,TDM）优化儿童他克莫司剂量虽可延迟实现适当的剂量,但增加了排斥事件或肾毒性的风险,而在治疗开始前进行功能基因的检测有助于更快地预测个体所需剂量,并防止免疫抑制过量/剂量不足。