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目的探究复方灵芝红景天制剂对环磷酰胺导致的免疫抑制小鼠免疫功能的影响,对比酶提取的复方灵芝红景天制剂与直接提取的复方制剂药效。探究复方灵芝红景天制剂对小鼠抗疲劳能力的影响。方法1、用环磷酰胺制备免疫抑制小鼠模型,选用100mg/kg和200mg/kg两种剂量的灵芝红景天复方制剂干预免疫抑制小鼠,选用不同提取方式提取出的灵芝红景天复方制剂干预免疫抑制小鼠。2、解剖正常小鼠、免疫抑制小鼠以及药物干预小鼠的胸腺、脾脏,计算小鼠的胸腺指数和脾脏指数;采集各组小鼠的外周血,进行外周血白细胞计数。3、制备各组小鼠脾细胞悬液,用Cona(终浓度为2μg/mL)和LPS(终浓度为10 μg/mL)刺激T细胞和B细胞的增值。用MTS/PMS方法检测T细胞和B细胞增殖能力,用ELISA方法检测脾细胞培养液中IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平;用流式细胞术检测脾细胞悬液CD4与CD8分子的表达情况,并计算CD4/CD8的比值。4、用酶处理的复方灵芝红景天制剂处理小鼠,干预28 d,进行力竭游泳实验,对比药物处理小鼠与正常小鼠的力竭游泳时间。5、摘眼球收集血浆与全血,用脲酶法检测小鼠尿素氮、用微量酶标法检测乳酸脱氢酶及全血乳酸含量、用硫代巴比妥法检测丙二醛(MDA)。6、解剖取各组小鼠的肝脏和腓肠肌,用比色法检测小鼠的肝糖原和肌糖原储存量。结果1、与环磷酰胺组(CTX)相比,灵芝红景天水提取复方制剂(CWO)低剂量组、灵芝红景天酶提取复方制剂(CEO)低剂量、CWO高剂量组、CEO高剂量组的脾脏指数、外周血白细胞计数、T淋巴细胞增殖率、B淋巴细胞增殖率和TNF-αα水平均显著增高(P<0.05)。各药物组小鼠的胸腺指数与环磷酰胺组相比,无统计学差异(P<0.05)。2、与环磷酰胺组比较,CWO高剂量组、CEO高剂量组的IL-6、IL-10表达水平显著增高(P<0.05);CEO低剂量组和CEO高剂量组的IFN-γ表达水平显著增加(P<0.05)。CTX组CD4+T细胞为7.64%,CD4/CD8比值为1.62,与 CTX组相比,CWO-Low 组、CWO-High 组、CEO-Low 组、CEO-High组的 CD4+ T 细胞占的百分比分别为20.9%、21.3%、26%、36.1%,均显著增高,有统计学意义(P<0.05)。CEO-High组的CD4/CD8比值分别为3.61,显著升高,有统计学意义(P<0.01)。3、与CWO高剂量组相比,CEO高剂量组的IL-10、TNF-α含量均显著增加(P<0.05);与CWO低剂量组相比,CEO低剂量组的IFN-γ含量显著增加(P<0.05)。与Control组相比,CWO低剂量组、CWO高剂量组、CEO低剂量组、CEO高剂量组的脏器指数、白细胞计数、T淋巴细胞增殖能力、细胞因子(IL-6、IL-10、TNF--α、IFN-γ)水平以及CD4/CD8 均无统计学差异(P>0.05)。4、与对照组比较,灵芝红景天复方制剂药物组的小鼠游泳力竭时间、血乳酸脱氢酶、肝糖原、肌糖原均显著增加(P<0.05)。5、与对照组比较,灵芝红景天复方制剂药物组小鼠血乳酸、尿素氮和丙二醛含量均明显减少(P<0.05)。结论1、复方灵芝红景天制剂可以增强环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫功能。2、酶处理提取后的复方灵芝红景天制剂在增强免疫抑制小鼠免疫力方面的药效优于直接水提取的复方灵芝红景天制剂。3、复方灵芝红景天制剂可以增强小鼠的抗疲劳能力。