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目的：本实验以宫颈癌Hela细胞为研究对象，分析天花粉蛋白(TCS)处理前后Hela细胞中miRNA表达谱的变化情况。探索TCS处理Hela细胞后miR-4455表达上调的机制以及对细胞迁移和侵袭的影响。 方法：⑴TCS处理人宫颈癌Hela细胞后，基因芯片技术分析药物处理前后Hela细胞中miRNA表达谱的变化情况。⑵实时定量PCR技术验证TCS对miR-4455表达的影响是否与芯片结果一致。⑶克隆miR-4455启动子并用报告基因技术验证其活性。⑷硫化测序PCR技术验证TCS处理Hela细胞后对miR-4455甲基化状态的影响。⑸Transwell实验检测高表达miR-4455对宫颈癌Hela细胞迁移和侵袭能力的影响。⑹Western blot检测高表达miR-4455对上皮间质转化(EMT)相关标志蛋白E-cad的影响。 结果：①利用miRNA芯片技术成功筛选出TCS处理前后差异表达的miRNAs，其中有10个miRNA表达下调，15个表达上调。②实时定量PCR验证了miR-4455表达上调与芯片结果相一致。③报告基因分析发现miR-4455上游1896bp片段中含有一个较弱的启动子。④硫化测序PCR分析发现TCS处理宫颈癌Hela细胞后对miR-4455启动子有去甲基化作用。⑤Transwell实验结果提示高表达miR-4455能在一定程度抑制宫颈癌Hela细胞迁移和侵袭能力。⑥Western blot结果表明高表达miR-4455增加了EMT相关上皮标志蛋白E-cad的表达。 结论：TCS处理宫颈癌Hela细胞能上调miR-4455表达，其机制可能与TCS使miR-4455启动子区域发生去甲基化相关。高表达miR-4455能在一定程度上抑制Hela细胞的迁移和侵袭，同时增加上皮标志蛋白E-cad的表达。上述研究结果进一步阐明了天花粉蛋白的抗肿瘤作用的分子机制，提示miR-4455在抗肿瘤治疗中的潜在应用价值。