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目的:观察马齿苋提取物对湿疹大鼠皮肤的治疗效果,探讨单品马齿苋的药效以及促进湿疹病变部位修复的作用机理。方法:1.SD大鼠70只,按体重随机分为7个组,每组10只,分别作为正常组、模型组、Caspase-14基因敲除组、阳性组、马齿苋提取物高、中、低剂量组。除正常组外,用电推剪及电剃须刀去除腹部毛发,面积约2cm×3cm,并涂5%的2,4-二硝基氯苯(DNCB)30μl于皮肤首次致敏;第5天,在右背部2cm×2cm剃毛区涂0.2%DNCB50μl进行二次抗原攻击,左背部对称的剃毛区不用药物作为对照部位。以后每隔3d激发1次,连续3次。于第9天观察大鼠右背部较左背部明显出现红斑,水肿,丘疹,糜烂或渗出,表明造模成功。实验第21天断颈处死,剪取造模皮肤,用分析天平称重测量湿疹大鼠皮肤肿胀度;QRT-PCR检测各实验组大鼠皮肤Caspase-14和Filaggrin基因表达;免疫组化检测TNF-α、IL-22、IL-4、IFN-γ积分光密度。2.另取大鼠50只,随机分为5组:正常对照组,阳性对照组,马齿苋低剂量组、中剂量组、高剂量组。各组按规定的剂量外用给药。实验当日,用0号砂纸擦伤大鼠剃毛处,局部再涂各组相应药物1次,末次涂药后10min,开始于创面处滴0.01%磷酸组胺每只0.05mL,此后每隔3min依0.01%,0.02%,0.03%,0.04%…浓度递增,每一浓度滴加后观察3min内大鼠是否回头舔右后足背,按此时磷酸组胺总量计算各组大鼠的致痒阂。结果:1.与空白对照组相比,高剂量组小鼠皮肤肿胀度明显小于空白对照组(P<0.01),中剂量组、阳性药物组小鼠皮肤肿胀度也小于模型组(P<0.05)。2.与正常组比较,模型组和Caspase-14基因敲除组大鼠皮肤组织细胞中Caspase-14和Filaggrin基因的2-ΔΔCT值极显著减小(P<0.01),与模型组和Caspase-14基因敲除组比较,马齿苋三个剂量组大鼠皮肤组织细胞中Caspase-14和Filaggrin基因的2-ΔΔCT值极显著增大(P<0.01)。3.与正常组比较,模型组大鼠皮肤组织TNF-α免疫组织化学检测积分光密度(IOD)极显著增大(P<0.01);模型组大鼠皮肤组织IL-22免疫组织化学检测积分光密度(IOD)极显著增大(P<0.01);模型组大鼠皮肤组织IL-4免疫组织化学检测积分光密度(IOD)极显著增大(P<0.01);模型组大鼠皮肤组织IFN-γ免疫组织化学检测积分光密度(IOD)显著减小(P<0.05)。4.磷酸组胺对不同剂量组的致痒阈记录显示,马齿苋提取物中剂量组的致痒阈高于阳性对照组(P<0.05),高剂量组明显高于阳性对照组(P<0.05)。结论:马齿苋提取物可以使血管收缩,抑制毛细血管通透性,抑制炎性肿胀,从而减轻湿疹局部的瘙痒、水肿症状。马齿苋提取物还可显著上调湿疹动物皮肤屏障系统中Caspase-14和Filaggrin基因的表达,提示马齿苋通过促进Caspase-14基因的表达而加速ProFilaggrin去磷酸化成为Filaggrin,进而加速Filaggrin水解成各种天然保湿因子,维护皮肤屏障功能。同时,马齿苋提取液通过降低TNF-a和IL-22在湿疹发病过程中的表达,提高IFN-γ的分泌抑制IL-4的表达,增强了机体的细胞免疫功能。