卵黄高磷蛋白（phosvitin，Pv）是卵黄蛋白原（vitellogenin，Vg）被卵母细胞吸收酶解后的主要产物之一，是一种富含磷酸化丝氨酸的具有两亲性的卵黄蛋白。研究表明，Pv具有螯合金属离子的作用、乳化性、抗氧化性、抗凝血酶活性和免疫作用等多种功能性质。本论文的目的是以鸡Pv为材料，研究其在免疫调节方面的功能。本论文第一部分对Pv的杀菌活性及机理进行研究。我们发现在50oC时Pv对革兰氏阴性菌大肠杆菌（Escherichia coli，E. coli）和革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S.aureus）的生长都有很强的抑制作用，但是37oC下Pv无显著的杀菌作用。将异硫氰酸荧光素（FITC）标记的Pv与各种细菌孵育后用荧光显微镜观察发现Pv可以分别与E. coli和S. aureus结合。通过酶联免疫吸附实验（ELISA）发现Pv可以特异性地结合病原相关模式分子（pathogen-associatedmolecular patterns，PAMPs）如脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、脂磷壁酸（lipoteichoic acid，LTA）和肽聚糖（peptidoglycan，PGN），并且结合呈现浓度依赖性，表明Pv是一种多价的模式识别受体。这些结果说明和鱼类Pv一样，鸡Pv也可以与LPS、LTA和PGN等PAMPs结合，并且具有抗菌功能。然而，鸡Pv的抗菌作用具有温度依赖性。脓毒症（sepsis）是由细菌感染所引致的全身炎症反应综合征（systemicinflammatory response syndrome，SIRS），常由外伤、手术以及烧烫伤等引发，是目前重症监护（intensive care units，ICU）病人高死亡率的主要原因，全球每年因脓毒症死亡的病人高达100万以上，死忘率高达40%-60%。LPS又称内毒素（endotoxin），是脓毒症的主要诱发因子，其靶细胞为单核/巨噬细胞系统，通过一系列的信号转导引发机体释放肿瘤坏死因子α（tumer necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin，IL）、白三烯（leukotriene，TL）、一氧化氮（nitric oxide，NO）等炎性因子，启动机体过度的、自我放大和自我破坏性的炎症反应。研究发现，许多蛋白或肽类不仅具有抗菌作用，还具有免疫调节作用，可以高亲和性地结合LPS并从源头上中和其毒性，从而降低对LPS诱导的TNF-α等细胞因子的释放，降低脓毒症小鼠的死亡率，避免器官损伤。因此，在本文第一部分发现Pv可以结合LPS的基础上，我们进行了鸡Pv中和内毒素作用的研究。目前普遍认为TNF-α是LPS毒性及脓毒症症状的一个好的指示因子。因此，我们首先用LPS和Pv等处理小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，通过ELISA检测细胞上清的TNF-α的浓度来检测Pv对LPS毒性的体外中和作用。我们发现Pv与LPS共同孵育的细胞释放的TNF-α水平较LPS和生理盐水共孵育组降低（p<0.05），这表明Pv在体外具有中和内毒素的作用。MTT检测和对红细胞的溶血活性检测表明，Pv不具细胞毒性或溶血活性，因此接下来我们又进行了Pv中和内毒素作用的体内实验。作为第一步，我们建立了昆明小鼠脓毒症模型，以便研究Pv对LPS毒性的体内中和作用。通过腹腔注射不同剂量的LPS，最终选取致死率达80%-100%的50mg/kg的LPS剂量用作建立模型。在Pv对脓毒症小鼠的保护作用实验中，每组18只小鼠腹腔注射50mg/kg LPS后随即分别注射生理盐水或Pv等，发现Pv可延缓脓毒症小鼠的死亡；模型对照组在16h-24h内达到死亡高峰，死亡8只，而实验组小鼠在此时间段内仅死亡1只；10d内实验组小鼠的存活率较模型对照组有所提高，尤其在LPS注射后24h-64h期间Pv的保护作用显著（p<0.05）。另外，通过ELISA检测血清TNF-α浓度发现，Pv可以显著降低LPS诱导的小鼠血清TNF-α水平（p<0.01）。以上结果表明，在体内Pv也具有中和内毒素的作用。我们的研究表明Pv具有治疗脓毒症的潜能，可以用作对脓毒症的辅助治疗，鉴于Pv在鸡蛋中的丰富含量以及鸡蛋的来源广范性，这在临床上将具有十分重要的意义。