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目的:(1)以Wilson病(WD)肝纤维化患者作为研究对象,在充分收集临床资料的基础上,运用临床流行病学及数理统计分析方法,开展对WD肝纤维化中医证候学研究,以期揭示WD肝纤维化中医基本证候特征,为深化WD肝纤维化中医治疗提供依据;(2)以WD模型TX小鼠作为研究对象,应用可逆转WD肝纤维化临床关键病机的肝豆扶木汤(GDFMT),在GDFMT的作用、不同浓度及不同时间干预下,采用免疫组化法检测肝组织中TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3、Smad4和Smad7蛋白的表达,探讨GDFMT抗WD肝纤维化的作用及其可能的分子机制。方法:临床部分对符合纳入标准的118例WD肝纤维化患者,按照拟定设计的WD肝纤维化中医证候调查表进行常见中医症状、体征及人口学资料调查,运用聚类分析、判别分析等数理统计分析方法,揭示WD肝纤维化临床症状和证候分布规律与特点。实验部分96只雄性TX小鼠随机分为模型组(生理盐水)、青霉胺组(青霉胺)、丹参组(丹参)、GDFMT低剂量组(简称低剂量组)、GDFMT中剂量组(简称中剂量组)、GDFMT高剂量组(简称高剂量组);另设正常对照组DL小鼠16只,共7组。7组小鼠分别给予相应的药物灌胃处理,每天1次,连续28天,于灌胃后2、4周结束时分批处死动物,每组每次8只。采用免疫组化SP法检测小鼠肝组织TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3、Smad4和Smad7蛋白的表达。结果:(1)临床部分:1)WD肝纤维化病位涉及肝、肾、脾、心四脏;其病变脏腑顺位为肝、肾、脾、心,肝脏累及频次最高;2)病变性质为虚实夹杂之证,虚主要为肝肾亏虚、脾气亏虚,实主要为痰浊内蕴、瘀阻脉络;证候方面以肝肾亏虚、痰瘀互结证多见;3)WD肝纤维化中医证候分布与患者年龄和病程有关,与性别无关。(2)实验部分:1)治疗2周和治疗4周后均可见如下结果。与正常组比较,模型组TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3和Smad4蛋白的表达明显升高,Smad7蛋白的表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,各治疗组TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3和Smad4蛋白表达均降低,Smad7蛋白表达则升高(P<0.05,P<0.01)。与丹参组、青霉胺组及低、中剂量组比较,高剂量组TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3和Smad4蛋白表达明显降低,Smad7蛋白的表达则明显升高(P<0.01)。与青霉胺组及低剂量组比较,丹参组和中剂量组TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3和Smad4蛋白表达均明显降低,Smad7蛋白的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);而丹参组与中剂量组的比较差异无统计学意义(P>0.05)。与低剂量组比较,青霉胺组TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3和Smad4蛋白的表达降低,Smad7蛋白的表达升高(P<0.05,P<0.01)。2)与治疗2周结果比较,各治疗组在治疗4周结束TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3、Smad4蛋白表达均降低,Smad7蛋白表达则升高(P<0.05,P<0.01)。结论:(1)WD肝纤维化以肝肾亏虚、痰瘀互结证为主要特征,病变脏腑顺位为肝、肾、脾、心;中医证候分布与WD肝纤维化患者年龄和病程有关,与性别无关。(2)GDFMT能有效抑制TGF-β1、TβRI、TβRII、Smad2、Smad3、Smad4蛋白的表达,促进Smad7蛋白表达,并呈显著剂量、时间依赖性,从而降低肝星状细胞(Hsc)的活化,减少细胞外基质(ECM)的分泌,发挥抗肝纤维化作用。