白菜类蔬菜是离体培养再生困难的一类作物,而基因工程等高科技育种技术都是建立在稳定可靠的高频率离体再生体系的基础上。探讨不结球白菜,特别是迄今未见报道的同源四倍体不结球白菜的高频离体再生体系具有重要的理论和实践意义。 本文以6个同源四倍体不结球白菜和2个二倍体不结球白菜的子叶为材料,研究离体培养过程中基因型对不定芽再生的影响,正交试验确定二、四倍体不结球白菜再生优化培养基;探讨材料再生能力与内源激素之间的相关性;并以四倍体不结球白菜雄性不育系为材料,研究外植体类型、生理苗龄、琼脂浓度、不同生长素类及细胞分裂素类生长调节剂等对离体不定芽再生的影响;再以二、四倍体不结球白菜雄性不育系的子叶为外植体,研究离体培养下不定芽诱导过程中生理生化的变化。最后对二、四倍体不结球白菜不定芽生根获得再生植株,对其驯化。进行形态及染色体等倍性鉴定,旨在建立同源四倍体不结球白菜稳定、高频的再生体系。结果表明: 材料的基因型是影响离体再生的关键因素。本试验通过正交设计研究TDZ(0.1、0.5和1.0 mg·L^-1)、NAA(0.1、0.5和0.8 mg·L^-1)和AgNO₃(0、5.0、和10.0mg·L^-1)3因素3水平对二、四倍体不结球白菜子叶离体培养,诱导不定芽。正交设计极差分析确定二、四倍体不结球白菜再生优化培养基和各因素的优水平及因子的影响顺序。在相同配方下对四倍体材料再生能力比较和根据最高诱导率进行再生能力比较,2种方法表明再生能力强弱与外植体内源激素细胞分裂素（ZRs）和生长素（IAA）含量的绝对值无显著相关,而与ZRs/IAA比值的大小显著相关,相关系数分别是0.9428和0.8857。比较2组二、四倍体不结球白菜再生能力表明四倍体不结球白菜再生能力强的其二倍体不结球白菜再生能力也强。二、四倍体不结球白菜内源激素含量表明四倍体不结球白菜内源激素含量比相应二倍体不结球白菜的有所增加。 以同源四倍体不结球白菜雄性不育系（4xCMS）为材料,研究发现外植体不同,不定芽再生能力大不相同。供试的三种外植体在相同条件下不定芽再生能力依次为子叶>下胚轴>根。外植体是子叶时,以5d为最佳苗龄,琼脂浓度为0.8%时,4xCMS的不定芽再生率最高,为83.3%。通过对不同细胞分裂素类和生长素类生长调节剂的配合使用,表明NAA和TDZ的配合可显著提高不定芽的再生率。 以二、四倍体不结球白菜雄性不育系为材料,研究在MS+0.5mg·L^-1TDZ+0.5 mg·L^-1NAA+10.0mg·L^-1AgNO₃+0.8%琼脂+3%蔗糖培养基上,子叶离体培养中3种抗氧化酶:过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的酶活变化、可溶性