苹果[Malus domestica Borkh.)是蔷薇科(Rosaceae)苹果属(Malus)多年生木本植物,是世界上栽培面积最广的果树树种之一,富士作为我国的主要栽培品种,其在栽培过程中易感苹果白粉病等各种病害,造成巨大的经济损失。抗病品种的缺乏成为生产上的突出问题。由于苹果童期长,遗传背景复杂等原因给常规杂交育种带来很大困难。现代基因工程直接在基因水平上改良,打破了物种间的界限,在培育抗病、抗虫、抗逆境等苹果优良品种中发挥越来越重要的作用。如今,多种有经济价值的外源目的基因被转入苹果。植物在受到病原菌入侵时,植物体内SA含量提高,植物NPR1蛋白从细胞质进入细胞核,与TGA转录因子相互作用,调控PR基因的表达,从而提高植物的抗病性。这种抗性具有系统、持久、广谱的特点,植物对该抗性并无不良反应。已有在各种不同的物种中获得其同源基因,并已证明该基因具有抗病能力。因此本试验目的是用根癌农杆菌介导的转化方法MhNPR1导入苹果,获得抗病的转基因植株。主要研究结果有以下几点：1.以苹果‘长富6号’的叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂、外植体类型、叶片放置方式对其不定芽再生的影响。结果表明：‘长富6号’叶片的最佳不定芽再生培养基MS+8mg/L TDZ+0.5mg/L NAA,叶片再生的最佳放置方式是正放,再生率可达100%。2.为培育抗病的苹果新种质,我们将MhNPR1基因转入苹果优良品种‘长富6号’中。将转基因植株进行PCR和RT-PCR检测,结果表明4个株系的染色体已整合了目的基因并转录表达。3.将通过PCR、RT-PCR的转基因株系和非转基因株系进行下游病程相关基因(PR1a,PR5,PR8)和与白粉病相关的基因(MdMLO)的表达分析和接种苹果白粉病试验。结果表明：PR1a基因在苹果非转基因株系没有表达,而在转基因株系中表达量得到不同程度的提高。PR5在转基因与非转基因植株中都没有表达,PR8与MdMLO.基因在转基因株系中的表达量均高于非转基因株系。在进行白粉病接种实验过程中研究发现：非转基因株系在接种白粉病第3天开始发病,病斑依稀可见,随后病斑逐渐扩大；而转基因株系没有任何感病迹象。这一结果有力说明MhNPR1基因过量表达可以增强富士苹果抗白粉病的能力。4.为研究MhNPR1基因在转基因植物中的表达,对转入MhNPR1基因的富士苹果1年生植株进行了苗期生长、叶绿素含量及光合特性的测定。结果表明：转MhNPR1基因株系的苗高与转基因株系相比表现出无规律变化,节间距均低于非转基因富士苹果。转基因株系的叶绿素及净光合速率均高于非转基因株系,对蒸腾速率和气孔导度进行比较,转基因株系蒸腾速率、气孔导度均高于非转基因株系,转基因株系的胞间CO2浓度低于非转基因株系。