脐血leptin水平及其与新生儿免疫功能的相关性研究

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目的:新生儿尤其是早产儿、宫内发育迟缓儿免疫功能存在一定缺陷,导致新生儿期感染性疾病发生率和死亡率仍然较高,极大地危害着新生儿的健康和日后的生存质量。研究发现神经内分泌、营养状况与免疫功能之间具有密切的相互作用,因此开展这方面的研究对于进一步探讨新生儿的免疫功能状态及其相关的免疫调节因素,从而有效的预防和治疗新生儿重症感染,降低新生儿死亡率,改善预后将具有重要的意义。瘦素(leptin)是近年来发现的由人体脂肪细胞分泌的一种蛋白激素,在人体能量平衡调节,组织器官发育,生殖功能,糖代谢等方面具有重要的调节作用。近来基础研究发现,leptin与免疫系统关系密切,并且在免疫调节中发挥重要作用。大量研究表明leptin可增强机体的免疫功能且在炎症反应中发挥保护作用。Leptin在胎儿期业已存在,且与胎儿宫内生长发育密切相关。但目前有关脐血leptin水平与机体免疫功能的关系及相关机制的临床研究,国内外尚未见报道。本研究通过检测不同胎龄的新生儿脐血leptin水平,血清免疫球蛋白、补体水平,T淋巴细胞亚群,Th1/Th2型细胞因子,淋巴细胞凋亡率及抗凋亡基因产物,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),研究:(1) 脐血leptin水平与新生儿免疫功能的关系。(2) leptin对淋巴细胞凋亡的影响。(3) leptin对Th细胞的激活作用及其可能途径。以期进一步阐明leptin与新<WP=4>生儿免疫功能的关系及其免疫调控机制,为leptin作为一种重要的免疫调节剂而应用于新生儿感染性疾病的防治提供理论依据。方法:选择我院及市妇产医院正常分娩的新生儿90例,分为早产儿组30例,足月儿组60例,各组按不同特征进一步分为小于胎龄儿组(SGA组)、适于胎龄儿组(AGA组)、大于胎龄儿组(LGA组)。于新生儿娩出后立即采集脐静脉血标本,分别采用放射免疫分析(RIA)、免疫透射比浊法及流式细胞术(FCM)检测新生儿脐血leptin、GM-CSF、IgG、IgA、IgM、C3、C4含量,脐血IL-4、IFN-γ含量及Bcl-2蛋白表达量,脐血T淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡率。数据采用t检验、方差分析、直线相关分析、Spearman等级相关分析、多元回归分析进行处理。结果:1. 各组新生儿脐血leptin含量比较: 早产儿组脐血leptin水平显著低于足月儿组(P<0.01)。在足月儿中SGA、AGA、LGA三组之间leptin浓度有显著性差异(P<0.01),且AGA组leptin浓度高于SGA组(P<0.05),而又显著低于LGA组(P<0.01)。早产儿SGA组脐血leptin含量明显低于AGA组(P<0.05)。女婴脐血leptin水平较男婴为高(P<0.05)。2. 脐血leptin水平的相关因素分析:相关分析表明脐血leptin含量与胎龄、出生体重、身长、重量指数(PI)及胎盘重量均呈显著正相关 (P均<0.01);多元回归分析表明出生体重和性别是脐血leptin的主要影响因素,脐血leptin含量的回归方程为:leptin(ng/ml)=-7.11+7.165E-03×出生体重(g)-2.805×性别(女=1,男=2)。3. 脐血leptin含量与新生儿体液免疫功能的相关性分析: 除IgG外,新生<WP=5>儿IgA、IgM、C3、C4含量均较低,而早产儿组IgG、C3含量较足月儿组更低(P均<0.01),早产儿组IgA、IgM、C4含量较足月儿组低,但经统计学处理差异无显著性(P均>0.05)。偏相关分析表明,脐血leptin含量与IgG (P<0.01)、C3 (P<0.01)、C4 (P<0.05) 均呈正相关,而与IgA、IgM无显著相关 (P均>0.05)。4. 脐血leptin含量与新生儿细胞免疫功能的相关性分析: 新生儿T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+)在早产儿组与足月儿组均无差别,新生儿IL-4、IFN-γ含量均较低,且IFN-γ含量相对更低。早产儿组IL-4平均含量高于足月儿组,经t检验,差异无显著性(P>0.05),而早产儿组IFN-γ含量显著低于足月儿组(P<0.05)。脐血leptin含量与CD4+T细胞百分率 (P<0.05)、CD8+T细胞百分率 (P<0.01)及IFN-γ含量 (P<0.05) 成正相关,而与IL-4含量成负相关(P<0.05)。5. 脐血leptin含量与GM-CSF含量、淋巴细胞凋亡率、Bcl-2蛋白表达量的相关性分析: 脐血中GM-CSF含量较高,早产儿组与足月儿组GM-CSF含量无显著性差异(P>0.05)。脐血leptin含量与GM-CSF含量成正相关(P<0.05),与Bcl-2蛋白表达量成正相关(P<0.05),与淋巴细胞凋亡率成负相关(P<0.01)。结论:1. 脐血leptin水平与胎儿宫内发育及新生儿营养状况密切相关,早产儿leptin水平显著低于足月儿,leptin水平在SGA显著低于AGA,更低于LGA。2. Leptin水平与胎龄、出生体重、身长、PI、胎盘重量呈正相关,而出生体重和性别是影响脐血leptin水平的主要因素。Leptin水平在男、女婴之间有显著差别,女婴显著高于男婴。3. 新生<WP=6>儿体液免疫与细胞免疫功能均存在一定缺陷,本研究进一步提示新生儿细胞免疫呈Th2反应优势状态,且早产儿较足月儿更为明显。4. 脐血leptin水平与新生儿免疫功能密切相关,leptin水平与补体含量、Th1细胞功能及淋巴细胞亚群呈高度正相关,而与IgA、IgM含量无显著相关,提示leptin对新生儿细胞免疫有正向调节作用,而对体液免疫影响较小。5. leptin可上调Bcl-2蛋白表达和GM-CSF含量,抑制淋巴细胞的凋亡,并认为此作用可能是leptin免疫调节作用的重要机制。
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