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1、 目的建立人肝癌HepG2细胞在氯化钴诱导的低氧环境下的生长模型,观察不同浓度氯化钴诱导的低氧环境对人肝癌HepG2细胞的增殖、细胞的周期与凋亡即细胞的生长状况影响,进而探讨氯化钴诱导的低氧对人肝癌HepG2细胞的生长代谢的作用机制,并进一步探讨肿瘤细胞对低氧环境耐受性变化,为临床上对肿瘤化疗治疗的疗效寻找理论依据。2、 方法对数期人肝癌细胞株HepG2细胞,随机分组对照组,不同浓度(50μm/L、100μm/L、 150μm/L、200μm/L) Cocl2实验组,通过MTT法检测HepG2细胞增殖情况计算细胞的抑制率并绘制HepG2细胞生长抑制曲线；划痕实验观察HepG 2细胞的迁移能力；通过流式细胞仪的Annexin-V FITC/PI双染法和PI单染法检测细胞的凋亡和周期变化；通过Western Blot法检测HepG2细胞的3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、Bcl-2蛋白的表达。3、 结果1.通过MTT法检测结果示在一定的时间和浓度范围内Cocl2抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,并呈时间-剂量依赖性关系,即细胞的增值率随着Cocl2浓度的增加和作用时间的延长逐渐减低。2. HepG2细胞经过划痕损伤试验后,实验组的细胞的迁移能力显著变慢,对照组在经过划痕实验24h后,细胞已基本迁移至划痕的中央,而实验组随着氯化钻浓度的增加,细胞划痕损伤面积未见明显减少,划痕明显,说明氯化钴抑制HepG2细胞的迁移及损伤修复能力,呈浓度依赖性关系。3.流式细胞仪的检测结果显示：对照组、不同浓度(50μm/L、100μm/L、200μm/L、 300μm/L、500μm/L)的实验组的细胞凋亡率(%)分别是：3.42、7.74、13.07、20.56、28.53、44.45(P<0.05),与对照组相比较试验组的凋亡率明显增加,并呈浓度依赖性。细胞的周期结果显示实验组的HepG2细胞随着氯化钴浓度的增加,处于细胞周期G。期的比例(%)由30.51增加到68.10,都高于对照组比例(%)的28.38；而S期比例则从42.51降低到17.58,都低于42.91的对照组比例(%),说明氯化钴能明显抑制HepG2细胞周期的变化,阻滞细胞周期于G1期,从而抑制细胞的增殖。4. Western Blot法检测：与对照组相比,经过不同浓度氯化钻处理后的实验组Bcl-2蛋白的表达明显减少。4、 结论在一定范围内,Cocl2诱导的低氧环境可以抑制人肝癌HepG2细胞的增殖以及愈合迁移的作用,诱导细胞凋亡并呈时间-剂量的依赖性关系,其作用机制可能与Bcl-2蛋白的表达减少有关。