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肝损伤是各种肝病共同的病理基础,及时控制肝损伤的发生和发展对治疗肝病具有重要的临床意义。病毒性肝炎的发病率在我国位于世界首位,虽然我国已经投入大量的财力和物力进行肝炎发病机制和治疗的研究,但是至今仍无满意的治疗药物。现代医学的治疗战略正在从对抗疗法转向调节对策,从抗病毒的研究趋向于改变机体,促进机体防御能力的研究。中医药防治肝病的长期临床实践积累给肝脏疾病药物研究奠定了基础,特别是前人对肝炎（中医相关疾病为“黄疸”等）治疗的理论总结和处方用药经验,为当今保肝药物研究提供了线索和捷径。鬼针草（Bidens bipinnata L.）系菊科鬼针草属一年生草本植物,在我国大多数省区均有分布。鬼针草药用历史悠久,味苦、性平而无毒,具有清热解毒,散瘀消肿等功效。其主要成分有黄酮苷、皂苷、生物碱、挥发油等,民间用于治疗痢疾、腹泻、肝炎、胃痛等。鬼针草富含黄酮类化合物,叶中含量高达5%,主要为查耳酮类、噢哢类、黄酮醇类等。但迄今为止,富含的黄酮类成分却未被开发利用。此外,在我省民间中医临床实践中发现,鬼针草及含有鬼针草的复方制剂治疗病毒性肝炎有很好疗效,可以显著降低肝病患者的ALT、AST,退黄,且无明显的毒副作用,是民间常用的保肝治肝药物。为了进一步开发利用鬼针草,我们对鬼针草总黄酮（total flavonoids of Bidens bipinnata L.,TFB）的制备工艺及其保肝活性进行了系统的研究。具体研究内容包括以下三个部分:1.鬼针草总黄酮制备工艺的研究采用正交实验法对鬼针草总黄酮乙醇提取工艺进行优化,确定乙醇提取的生产工艺为用12倍量80%乙醇提取2次,每次1小时。并从总黄酮静态吸附-解吸量、动态吸附-解吸量、静态吸附动力学过程等方面,对国产七种大孔吸附树脂进行研究,选择出了一种最适合于制备鬼针草总黄酮的大孔吸附树脂HPD100。并对HPD100纯化总黄酮的工艺参数进行考查,确定其工艺条件为原液上样浓度为1～1.5mg·mL-1,以2BV·h-1的吸附速率进行吸附,最大上样量以总黄酮计为4.99mg·ml-1树脂。吸附后先以4BV水洗去杂质,再用4BV的70%乙醇以4 BV·h-1的速率进行洗脱。在此条件下进行吸附、洗脱,树脂可重复使用5次。经大孔树脂吸附、乙醇解吸后,采用比色法测定总黄酮含量为72.1%,得率为4.7%。2.TFB质量标准的研究质量控制是中药研制工作的重点。本文利用化学鉴别法和薄层层析法对TFB进行定性鉴别;采用NaNO2-Al（NO3）-NaOH显色系统,用紫外分光光度法测定了鬼针草总黄酮提取物中黄酮的含量。TFB的含量为73.3%,平均回收率为96.51%,RSD为2.61%。该法简便、快速、重现性好,可用于TFB的质控方法。应用高效液相色谱法对TFB中金丝桃苷的含量进行测定。采用HypersilODS2 5μm色谱柱（4.6mm×250mm）,流动相为乙腈-3%醋酸溶液（13:87）,流速为1.0ml·min-1,检测波长为363nm,柱温为30℃,采用外标法定量,测定TFB中金丝桃苷含量。金丝桃苷的线性范围为1.2526～34.1μg·mL-1,r=0.9998;回收率99.62%,RSD为1.75%。该法对黄酮类化合物的分离度良好,所确立的质量标准可以有效的控制TFB的含量,为TFB及制剂的开发研究奠定了基础。3.TFB对小鼠急性肝损伤的保护作用及部分机制研究在优化的TFB制备工艺条件下,以CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型,初步研究TFB的保肝作用。实验结果表明:TFB(50、100、200 mg·kg-1)ig给药,与模型组比较,能显著降低CCl4肝损伤小鼠的肝脏指数,降低血清ALT、AST活性。光镜下病理组织学检查表明给予TFB后能明显减轻肝组织变性、坏死程度,并减轻炎症反应。以上结果提示:TFB对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤有明显的预防作用。进一步研究发现,与模型组比较,TFB显著降低小鼠肝匀浆中MDA、NO含量,升高肝匀浆SOD、GSH-Px活性。同时TFB明显抑制肝组织中NF-κB的表达。电镜对肝细胞超微结构观察结果显示:给予TFB组肝脏线粒体肿胀程度明显减轻,肝细胞核病理改变减轻,结构较模型组清晰。以上研究结果提示:TFB对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的预防作用可能与其抗脂质过氧化,抑制NO的产生,抑制NF-κB的表达有关。