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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由病毒引起的一种猪的繁殖性障碍和呼吸系统传染性疾病。临床特征是厌食,发热,怀孕的后期发生流产,死胎,木乃伊胎,幼龄猪发生呼吸系统疾病或死亡。此病最早在1987年美国中西部发现,之后在北美,德国,法国,荷兰等欧洲国家及亚洲国家发现。刚开始,因为不明白病因,欧洲的一些国家将本病称为“猪神秘病”,又由于发现部分病猪的耳部出现发紫现象,故又称此病为“猪蓝耳病”,还有人称其为“猪不孕与呼吸综合征”和“流行性流产与呼吸道综合征”。我国大陆由郭宝清等人在1996年首次分离到PRRSV,随后就在全国很多地方分离到了此病毒,如今PRRSV已经在我国广泛存在,并且疫情状况比较严重。为了解新乡地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪群体内的流行和进化情况,通过调研,本实验室收集了对该地区某猪场送检的疑似猪繁殖与呼吸综合征的组织病料,首先对送检病料进行PRRSV核酸鉴定,其次选择阳性样品进行病毒的分离鉴定。结果显示:送检疑似样品中有80%核酸阳性率,并从其中的一份阳性样品中成功分离出一株PRRSV,该株病毒经间接免疫检测结果发现其能与PRRSV特异性N蛋白抗体结合。分离出的PRRSV代表株为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒在新乡地区的分子进化提供了分子证据。为了进一步研究Xinxiang2015株PRRSV的序列特征,本研究采用分子生物学技术,提取病毒感染细胞后的总RNA,经反转录、PCR扩增、目的基因回收、T载体连接、转化大肠杆菌、挑取阳性克隆、序列测序和序列分析等过程分别克隆了Xinxiang2015株PRRSV的非结构蛋白Nsp2和结构蛋白GP5蛋白的基因全长序列。Nsp2蛋白的实验结果显示:本次试验克隆出Xinxiang2015株PRRSV的Nsp2基因,该基因全长3483bp,与VR-2332株、Ch-1a株、HuN4株、HENAN-XINX株中的Nsp2基因进行核苷酸同源性分别为80.5%、96.0%、96.2%和67.8%,进一步比对结果发现Xinxiang2015株PRRSV NSP2蛋白与经典的PRRSV和高致病性PRRSV相比,该序列存在3处连续氨基酸的不连续缺失,即除了具有高致病性的2处不连续缺失外在第485~488位还存在4个氨基酸的缺失;GP5蛋白的实验结果显示:Gp5蛋白基因全长603bp,该基因与VR-2332株,Lelystad virus株,Ch-1a株,HuN4株和HENAN-XINX株中的GP5基因进行核苷酸同源性的分析和对比,同源性分别为89.4%,49.6%,94.9%,99.3%和85.7%;NSP2蛋白和Gp5蛋白的进化树分析结果均表明Xinxiang2015株PRRSV属于高致病性PRRSV。本次试验的研究结果为进一步证实了河南省周边近年来流行的PRRSV为高致病性PRRSV,同时也为了解全国范围内猪繁殖与呼吸综合征病毒的进化研究提供了证据。