OsPHS9通过脱落酸信号途径调控水稻穗发芽

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种子是确保高等植物生命延续的重要器官。种子休眠是一个适应性性状,能够促进植物在不利的环境下存活,并防止穗萌,这一时期种子处于干燥的状态。在水稻、小麦、大麦以及玉米等谷类作物中,穗发芽严重影响了其产量和品质。而种子休眠与萌发的调控是一个复杂过程,受到内部因素以及外界环境信号协同与拮抗的影响。  脱落酸(ABA)与赤霉素(GA)是种子休眠状态的重要调节因子,ABA促进并维持种子休眠,而GA促进种子休眠解除及萌发。油菜素内酯(BR)与乙烯也参与种子休眠性的解除。  细胞内的氧化还原水平通过氧化还原修饰细胞信号转导重要组分蛋白半胱氨酸残基从而在细胞内信号通路中起着重要作用。活性氧(ROS)在种子休眠性解除中也起到一定作用。而谷氧还蛋白是维持细胞内氧化还原环境重要的抗氧化剂。  本研究中,我们从实验室T-DNA突变体库中鉴定到一个显性穗发芽突变体,命名为phs9-D(pre-harvest sprouting9)突变体,SiteFinding-PCR与图位克隆结果表明,PHS9编码一个高等植物特有的CC-型谷氧还蛋白,OsGrx_A1。分子生物学及生理学实验表明,phs9-D突变体穗发芽表型是由于在种子进入休眠时期种子中ABA含量急剧下降而引起的。phs9-D突变体还表现出对ABA敏感性降低,对H2O2以及BR不敏感的表型,此外,phs9-D突变体中GA合成下调。定量PCR与原位杂交结果显示,PHS9在胚中特异表达。激素诱导实验表明PHS9受ABA与BR的诱导。亚细胞定位实验结果显示,PHS9定位在细胞膜、细胞质以及细胞核中。酵母双杂交与荧光双分子互补实验表明,PHS9与OsGAP相互作用。双向电泳分析表明OsMFT1在phs9-D突变体中大量积累,而OsMFT1的积累进一步抑制了OsABI5的表达,从而促进了种子萌发。这些结果表明,PHS9通过与OsGAP相互作用,参与ABA信号的传导,从而调控水稻穗发芽。
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