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丙型肝炎病毒生活周期的重要步骤，如侵入细胞，复制，组装等都依赖于膜状细胞器或组织提供平台。当病毒的10个蛋白在内质网膜上被切割而成熟后，它们都需要各自的跨膜或者两亲性螺旋α结构介导其与细胞内膜的结合，从而保证其能在病毒生活周期中行使各种生物功能。NS3蛋白的N端第10-24个氨基酸组成了一个两亲性螺旋α0结构来介导其与内质网膜的结合。为了研究这个螺旋α0在丙肝病毒生活周期中的具体生物学和病毒学作用，我们通过研究在该螺旋α0的两种突变产生的两种不同表型：1)M21P突变完全破坏了病毒的复制和产生；2)M21T突变促进了病毒的产生，来阐述该螺旋α0结构对病毒复制，组装等生活周期的具体影响。 M21P突变破坏了螺旋α0的螺旋结构，并因此导致病毒无法复制。为了研究具体机制，我们发现M21P突变并没有影响NS3蛋白本身的酶活性，也没有影响NS3对NS2-3和NS3-4A位点的切割，然而却导致了NS3蛋白的不稳定性。由于NS3蛋白失去了螺旋α0结构，即使在NS4A的帮助下，仍然无法和内质网膜结合，而游离在胞浆内的NS3或者NS3-4A前体蛋白则很快被宿主蛋白酶体降解，最终使得病毒无法复制。 M21T突变可以促使病毒在转染早期产生。在对于其具体机制的研究中，我们发现M21T突变并不影响螺旋α0的结构，NS3蛋白亚细胞定位，NS3蛋白的酶活性和多聚蛋白的切割。同样，M21T突变并不能增强突变NS3蛋白对MAVS的切割能力及抑制干扰素产生的能力。M21T突变不影响病毒的复制，然而却可以显著增强病毒的组装效率，并且M21T突变影响病毒组装是发生在核衣壳组装完成之后。 对于NS3蛋白在病毒生活周期中的作用研究多数来自对其蛋白酶及解旋酶/水解酶活性的分析。在我们的工作中，第一次通过研究NS3的亚细胞定位来揭示其在病毒复制和组装中的作用。我们证明了NS3蛋白通过其N端的螺旋α0在内质网膜上精确定位，以保证蛋白稳定性，对病毒多聚蛋白和MAVS宿主分子的切割效率及病毒组装的高效进行。这项工作对进一步阐明丙肝NS3蛋白调控病毒复制和组装的分子机制提供了新的思路和证据。