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实验目的：卵巢癌为妇科常见肿瘤，死亡率高，传统方法治疗效果较差，需要寻找新的治疗方法。上皮生长因子受体(EGFR)是细胞膜表面重要的受体结构，EGFR信号传导介导细胞生长、血管生成及DNA的修复等，在上皮源性肿瘤中呈现高表达，包括卵巢癌和外阴癌。近来认为它是肿瘤治疗的新靶点。RNA干扰(RNAi)是近年发展起来的一种基因沉寂技术，具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、下调或沉默基因表达的作用。本实验应用RNA干扰技术进行体内外研究，探讨其抑制卵巢癌SKOV3细胞和外阴癌A431细胞EGFR表达，从而抑制肿瘤细胞生长，治疗卵巢肿瘤的可行性。实验方法：用脂质体转染法将靶向EGFR的短发夹RNA(shRNA)转染SKOV3和A431细胞，采用MTT法检测siRNA-EGFR的细胞增殖抑制作用，用流式细胞分析和Hoechst染色法检测siRNA-EGFR的促细胞凋亡作用。建立裸鼠卵巢癌模型，进行裸鼠尾静脉注射，25μg siRNA质粒／100μg liposome／只，每周两次，共治疗10次，记录裸鼠肿瘤生长情况并计算体积，用CD31免疫组化染色检测肿瘤组织内微血管密度(MVD)，HE染色观察肿瘤组织形态及各脏器毒副反应，了解siRNA-EGFR在体内的抗肿瘤效果。实验结果：1．采用通用的阴性对照构建成pGPU6-shNC质粒的研究中，体外实验结果为：MTT法、流式细胞分析和Hoechst染色法都显示siRNA-EGFR对SKOV-3细胞的抑制作用与空白对照组及脂质体组有显著性差异(p＜0.05)，但与阴性对照组siRNA-NC无显著性差异(p＞0.05)。动物实验表明，siRNA-EGFR组肿瘤体积小于空白对照组，MVD明显低于空白对照组，但siRNA-EGFR与阴性对照组siRNA-NC之间无显著性差异(p＞0.05)。2．采用重新构建的空白载体作为阴性对照，再次体外实验显示siRNA-EGFR对SKOV3细胞和A431细胞有抑制增殖及促凋亡作用，与空白对照组及空白载体组都有显著性差异(p＜0.05)。结论：该研究初步表明siRNA-EGFR在体外能有效地抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡。在体内尚需重复验证，但它仍有潜力成为一种治疗卵巢癌的新方法。