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呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)是由雪腐镰刀菌、串珠镰刀菌、尖孢镰刀菌等镰刀菌所产生的一类毒素,广泛存在于小麦、玉米等饲料原料及成品饲料中,是检出率和超标率最高的一种真菌毒素,对动物和人的危害巨大。微生物发酵处理作为一种安全环保的处理方式,成为研究呕吐毒素降解的热点。本研究旨在筛选出对呕吐毒素降解能力高的微生物菌株,对其进行鉴定培养并应用于饲料原料的生物脱毒处理中。试验从不同环境中采集土壤、淤泥、发霉秸秆、鸡肠道内容物、猪粪、牛粪等样品共10份。将DON添加到LB,NA和MRS固体培养基中以制备用于初始筛选菌株的改良的固体筛选培养基。通过初步筛选获得到的菌株在改良液体培养基培养,并且通过ELISA测量改良培养基中DON的降解率对菌种进行复筛,根据培养基、培养方式和降解率,选择部分分解菌进行形态学观察、革兰氏染色、显微镜镜检和16Sr DNA保守序列分析,确定其种属。组合所筛选和鉴定的菌种,优化出发酵条件,对麸皮和豆粕中的天然DON进行降解实验。研究结果表明:通过初筛筛选到80株能够在初筛培养基生长的菌种,经过复筛筛选到DON降解率从9.7%~66.7%的菌种16株。选择降解率分别为19.1%、51.3%、66.7%的菌种3株,通过菌落特征、菌体特征等形态学观察和16S rDNA保守序列比对的分子鉴定。其中,LB01菌株为乳白色,不透明,表面粗糙,边缘不规则,干燥,有褶皱,菌体呈长杆状,有荚膜,有芽孢,与GeneBank中EnB-alf13(KP792638.1)的相似度达到92%的降解菌为枯草芽孢杆菌;菌株NA06的菌落为乳白色,表面干燥且不透明,中间褶皱边缘不整齐,菌体两端钝圆,呈长杆状,没有伴孢晶体,成对或链排列,孢囊没有明显的肿胀,与GeneBank中MSC46(KM222187.1)的相似度达到99%的降解菌为解淀粉芽孢杆菌;菌株MRS13为乳白色半透明,直径在0.4~2.0 mm,边缘整齐,凸起、光滑且表面湿润,菌体呈短杆状,且其菌体的排列方式有单个和链状排列,无芽孢,与GeneBank中Sourdough-H04(MG754699.1)的相似度达到99%的降解菌为植物乳杆菌。通过单因素试验确定降解麸皮中DON的最优发酵参数为:接种量10 mL/100g,发酵温度37℃,发酵时间48 h。通过不同发酵底物对比试验,发酵麸皮时,枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合对麸皮中呕吐毒素降解率最高,达71%。相同发酵条件下,解淀粉芽孢杆菌对豆粕中呕吐毒素降解率最高,达82%。