论文部分内容阅读
本研究以卫矛(Euonymus alatus(Thunb.)Sieb)不同部位为外植体,探讨了取材时间及灭菌方法对茎段消毒效果的影响;研究了沙藏与未沙藏、成熟与未成熟、带假种皮与去除假种皮及GA3浓度4种因素对种子萌发的影响,沙藏与未沙藏的成熟种胚、NAA(0.5、1.0、2.0mg/L)和 6-BA(0、1.0mg/L)对不定芽诱导的影响,以及 NAA(0.5、0.05mg/L)、6-BA(1.0、2.0mg/L)和琼脂(6.5、7.0g/L)对茎段不定芽诱导的影响,探讨了基本培养基、2,4-D、TDZ、暗培养时间4个因子对花生殖器官(花萼、花瓣、雄蕊、雌蕊)和叶片的愈伤组织诱导的影响,从而筛选出最佳外植体及诱导方式;继而在基本培养基、6-BA、NAA、GA34个因子3个水平中选出不定芽增殖的最佳培养基;最终从添加NAA、IAA、IBA(0.2-4.0mg/L)及GA3(0.2-0.8mg/L)的28个处理中筛选出试管内生根最佳方法,并与试管外生根下的基质、生根剂、激素浓度的4个水平中的最佳生根方法进行了比较,筛选出卫矛最佳生根法。研究结果如下:(1)茎段最佳取材时间是5月中旬,染菌率为3%,存活率76.67%;最佳消毒方法是Hgc12 8min并加入两滴吐温-20,存活率59.67%。(2)去假种皮的沙藏种子在MS+GA32.0mg/L培养基中培养20d后萌发出子叶,种子萌发诱导率(10.2%)高于其他处理。含叶中脉的叶片在WPM+2,4-D 0.8 mg/l+ TDZ 1.0 mg/1培养基中的愈伤组织诱导率最高(65%-67%),但没有 B5+2,4-D 1.2 mg/l+ TDZ 2.0 mg/l+暗培养 20d处理中的雌蕊愈伤组织诱导率(均值86.5%)高。雌蕊愈伤组织为浅绿疏松状,并不是最佳愈伤组织形态。因而用卫矛叶片、雌蕊作为外植体诱导愈伤组织未取得成功,还有待研究。种胚不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L +NAA0.5mg/L,不定芽诱导率为12.8%。而茎段在6-BA2.0mg/L+NAA0.05mg/L培养基中的不定芽诱导率可达70.67%,远远高于种胚,因而茎段可为卫矛不定芽诱导的最佳外植体。(3)MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L是卫矛不定芽增殖的最佳培养基,增殖系数为23.51,即获得的丛生芽芽数为23.51个。在其上继代培养3次后,丛生芽芽数可增殖到48.5个。(4)卫矛试管内生根最佳培养基为1/2MS+GA30.4mg/L,生根率72.5%,平均生根数4.1条。试管外生根的最佳条件是蛭石+IAA2500mg/L,生根率为100%,平均生根数为5.3条。两种生根方法均可有效促使卫矛组培苗生根,但以试管外生根更佳。