GP73(Golgi Protein73，又称GOLPH2)是近年发现的一种II型高尔基体驻膜蛋白。研究发现GP73在肝癌和前列腺癌患者体内高表达，从两栖类到哺乳动物类GP73蛋白的氨基酸序列具有很高的保守性，尤其是N端的区域。各种证据表明GP73具有重要的生理功能，但它的功能和表达调控机制仍然不明。本研究的目的是通过克降有效的启动子着手研究转录调控机制，并且通过对突变体截短突变体的研究来探索蛋白的功能。　　 一方面克隆了GP73的启动子。对gp73 mRNA5’端核酸序列进行分析，扩增到预测的启动子片段，并构建了以EGFP为报告基因的报告质粒，转染HeLa细胞后，观察EGFP的表达，并对EGFP的表达进行了半定量。结果表明：在转录起始位点上游980bp到下游330bp的区域具有启动子活性。该片段具有两个可能的核心启动子序列，以及多个保守序列，包括2个TATA box和NF-кB、AP1、GC-SP1等转录因子结合序列。　　 另一方面构建了C端带有Flag标签的N端和C端缺失的各种截短突变体为蛋白功能研究提供依据。突变体在HeLa细胞中瞬时表达后，分析不同的截短突变体在糖基化修饰和亚细胞定位等方面的变化，发现位于胞浆区的12个氨基酸序列对蛋白的修饰和高尔基体定位十分重要。对这个12个氨基酸的序列进行分析时，发现该区域具有一个十四烷基化保守序列[GLGNGRRS]。由于N-十四烷基化对许多蛋白的亚细胞定位和修饰必不可少，因此，我想验证GP73是否因为存在这种修饰而影响到其它修饰和亚细胞定位。甘氨酸是十四酰基化转移酶识别位点，因此用丙氨酸替代甘氨酸构建点突变体，突变体在HeLa细胞中表达后，发现他们的亚细胞定位和分子量与全长的GP73蛋白相比没有明显区别。结论：胞浆区对蛋白N-糖基化修饰和高尔基体亚细胞定位十分重要，N-十四烷基化修饰不影响蛋白的修饰和亚细胞定位。