MRI引导下氩氦刀靶向冷冻系统建立犬股骨头坏死模型的新方法相关研究

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研究目的股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head, ONFH)是骨关节外科发病率较高的疾病之一,其在创伤、酒精、激素等致病因素的作用下,出现股骨头骨质的破坏,最终可导致股骨头塌陷和骨关节炎,影响患者的生活质量。目前尚无完全治愈的办法。尽管很多学者采用清除坏死骨组织、骨髓细胞移植、髓芯减压、带血管骨组织植入等多种保留股骨头的方法,但其效果往往较差。患者最终仍需接受人工关节置换术。目前对股骨头缺血坏死的病因及治疗性研究中,对动物模型的制备常见有三种方法:激素诱导法、酒精诱导法和液氮冷冻等方法。激素诱导法和酒精诱导法多用于酒精、激素的病因分析研究,液氮冷冻法多用于股骨头坏死的治疗性研究。但是应用这些方法,具有动物模型建立时间长、成功率低、创伤较大、动物死亡率高等缺点。本实验旨在实验一种新方法,即在磁共振(MRI)引导下对股骨头进行精确定位,应用氩氦刀靶向冷冻系统建立犬股骨头缺血坏死模型。氩氦刀靶向冷冻系统是一种微创低温冷冻消融肿瘤的医疗设备,目前广泛应用于全身实体肿瘤的治疗。在MRI定位引导下,将氩气刀准确穿刺进入肿瘤体内,然后首先启动氩气,氩气在刀尖迅速冷却至-140℃~-170℃,持续10分钟,关闭氩气,再启动氦气,氦气在刀尖极速膨胀加热超低温状态的病变组织,持续5分钟。此种冷热逆转疗法对组织的摧毁是彻底的。因此,氩氦刀靶向冷冻系统为股骨头坏死模型的建立提供了可行性。方法选取12只健康比格犬,体重10.4±2.1kg,取12只比格犬左侧股骨头作为A组,右侧股骨头作为B组。在MRI引导定位下,将氩氦刀沿股骨颈进入股骨头区域,对A组股骨头冷冻-复温两个循环,对B组股骨头冷冻-复温一个循环。单个循环冷冻10分钟,复温5分钟。于造模后4周、8周、12周行股骨头X线和磁共振检查,然后取出股骨头进行大体形态对比观察,最后行组织病理切片观察。结果X线显示造模后4周无明显改变,8周后股骨头密度改变,造模后12周A组股骨头负重区出现小囊变;MRI示造模后4周股骨头出现水肿和关节积液信号,造模8周后股骨头出现低密度改变,成灶状、线状,造模后12周出现股骨头坏死的表现,A组较B组明显;病理学观察造模后4周病理学观察无明显异常,造模后8周软骨细胞排列稀疏,潮线中断,骨细胞和骨髓细胞发生坏死表现。造模后12周软骨细胞和骨细胞坏死明显,部分发生修复过程,A组潮线完全缺如。A组造模后4周、8周、12周空骨陷窝细胞率分别为33.75±2.77,37.46±3.01,43.27±2.98,B组分别为21.08±2.61,25.43±2.82,29.56±2.73,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本实验成功通过氩氦刀靶向冷冻系统制备了股骨头坏死的模型,且应用两个冷冻-复温循环周期对制造股骨头坏死模型更可靠,可作为标准化的股骨头坏死造模方法。
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