[目的]1、分析云南省手足口病的流行特征,为手足口病防控策略和措施制定,疫情趋势评估和免疫策略制定提供参考。2、了解手足口病患者家庭内密切接触者感染的情况,为家庭成员隐性感染在手足口病流行方面作为传染源,以及在持续高发的成因方面提供参考。[方法]用描述流行病学方法,对云南省2008-2016年手足口病疫情资料进行分析。基于医院的横断面研究和家庭的随访研究,于2016年6月-2016年9月,用非随机的方法,在弥勒市医院选取了 102例确诊手足口病例,用构建的问卷对相应的203名家庭内密切接触者进行调查,并采集粪便标本。7个州市对98例确诊病例的216名密切接触者进行调查和采集粪便标本。用RT-PCR方法对粪便标本进行肠道病毒核酸检测,对用肠道病毒特异引物扩增的产物进行序列测定,用DNASTAR软件的SeqMan模块对DNA序列进行编辑,在NCBI GenBank数据库进行BLAST比对进行分子定型。用MEGA7.0软件绘制基因亲缘性进化树。对收集的数据采用Epidata 3.0构建数据库,用SPSS 23.0统计软件分析,对数据进行流行病学描述性分析,计数资料采用χ2检验分析,相关性分析采用Spearman相关系数,多因素分析采用Logistic回归进行分析。[结果]1、2008-2016年云南手足口病报告发病率在25.17-192.47/10万之间,发病呈上升之势,发病强度超过全国平均水平。2、云南省手足口病全年均有发病,有两个季节高峰(主峰在4-7月,次峰在 10-12 月)。3、全省129个县均有病例,各地发病强度有差异,玉溪、昆明、德宏、西双版纳和丽江发病率较高(发病率在314.03-134.44/10万之间)。4、病例男性多于女性(1.43:1),主要分布在5岁以下儿童,且各年龄组之间存在差异(χ2=34674.132,p<0.001),0岁组发病率最低,1岁组发病率最高,而后随年龄增加发病率逐渐下降;发病以散居儿童为主(占69.5%),其次为幼托儿童(占26.1%)。5、重症病例数占总病例数的1.7%,报告较多地区是昆明(68.1%)、曲靖(10.8%)、红河(7.5%)。男性(OR=1.085,CI:1.025～1.140),低年龄组儿童[0岁(OR=2.965,CI:2.471～3.557)、1 岁组(OR=2.200,CI:1.885～1.568)、2岁组(OR=2.100,CI:1.788～2.467)]和 EV-A71 感染(OR=2.581,CI:2.471～3.557)是重症病例的高危因素。死亡病例占总病例数的0.03%,死亡病例较多地区为昆明(34.3%)、红河(12.6%)、大理(8.4%),曲靖(8.4%)和德宏(7.7%);死亡病例中98%由EV-A71感染所致,低年龄组[<1岁(OR=2.242,CI:1.901～2.645)、1 岁组(OR=2.242,CI:1.901～2.645)、2 岁组(OR=2.098,CI:1.767～2.490)]和EV-A71感染(OR=8.041,CI:7.174～9.013)是死亡发生的高危因素。6、实验室监测数据显示,云南省手足口病病原以EV-A71型(40.34%)和CV-A 16型(37.86%)为主,两种病原优势在不同年份交替出现;但近年其他肠道病毒病原的构成呈上升趋势,从2008年的3%上升至2016年的41%。7、将弥勒市102例确诊病例和203名家庭内密切接触者纳入研究。102例确诊的手足口病病例中,男女比例为1.49:1,平均年龄2.16±1.51岁(0-7岁),以散居儿童为主(70人,68.6%),其次为幼托儿童(32人,31.4%)。患者均有典型临床表现,患病危险因素单因素分析为饮用生水(p=0.003<0.05)和食用生冷食物(p=0.020<0.05);203名病例的家庭内密切接触者,男女比例为0.69:1,平均年龄31.50±13.92岁(0-82岁),职业中以农民为主(75.9%);与患者关系中,父母关系最多(73.9%),其次为(外)祖父母(14.8%),弟姐妹及其它关系较少(11.3%)。102个病例家庭中,家庭感染率为22.55%,其中病原一致率为79.31%;家庭内密切接触者感染率为15.27%,病原一致率为81.58%。家庭内成员与患者接触时间的长短与病毒阳性率没有差异(χ2=3.894,p=0.221>0.05);家庭内密切接触者不同家庭成员肠道病毒阳性率没有差异(χ2=1.537,p=0.491>0.05)。调查可能的危险因素(包括接触时间、家庭成员、家庭居住平均面积、饮用水、厕所、生活习惯等)。8、7个州市(楚雄、曲靖、昆明、昭通、玉溪、西双版纳、德宏)共有98例手足口确诊病例和216名病例的家庭密切接触者纳入调查。98例确诊病例中,男女性别比为1.72:1,平均年龄2.64±1.64岁(0-10岁)。216名家庭密切接触者中,男女性别比为0.76:1,平均年龄32.55±15.62岁(1-74岁),家庭成员关系中,父母最多为140人(64.81%)、(外)祖父母46人(21.30%)、兄弟姐妹30人(13.89%)。家庭感染率为51.02%,一致率为51.02%;密切接触者感染率为38.92%,病原一致率为83.16%。不同家庭成员间肠道病毒阳性率差异无统计学意义,(外)祖父母病原一致率高于其他人,具有差异(χ2=6.364,p=0.041<0.05);病例密切接触者病毒阳性率单因素分析,家庭成员数、采样间隔时间、接触儿童数量、住房建筑面积、孩子便后是否用肥皂或洗手液洗手、最近两周内是否带孩子到过公共场所等变量与家庭密切接触者感染有关;多因素分析,家庭密切接触者感染的危险因素为家庭成员数越多、住房建筑面积越大、采样时间间隔越短,病毒阳性率性越高。9、家庭内密切接触者病毒阳性率与采样距病人发病的时间间隔有关(χ2=11.732,p=0.008<0.05),采样距病人发病时间较短,病毒阳性率越高。10、基因序列分析结果显示患者与家庭内密切接触者病毒基因序列高度同源(95.6%-100%),同一家庭内分离的毒株进化分析均自成一簇,3个家庭各自形成3小簇。[结论及建议]1、云南省手足口病的流行特征与全国其他地区基本相似,云南省手足口病的发病和重症病例的发生呈逐年上升趋势,尽管近年采取了一些常规的公共卫生防控措施,但目前的发病现状提示降低发病率的效果并不明显。感染EV-A71病毒的低年龄组儿童是重症病例和死亡病例发生的高危因素。2、本研究表明,手足口病病例的家庭感染率和家庭内密切接触者感染率较高,形成了大量的隐性感染者,隐性感染者作为传染源难以控制,可能在手足口病传播方面起着重要的作用,这也可能是手足口病疫情难以控制,持续广泛流行,高发的原因之一。人是人类肠道病毒唯一的宿主,疫苗免疫是控制手足口病最经济、最有效和最方便的手段。应在适龄儿童中推广EV-A71疫苗及新的手足口病疫苗的接种。