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目的：通过研究TRAIL对人视网膜母细胞瘤株HXO-RB44细胞的增殖抑制率、细胞周期的影响、诱导细胞凋亡的情况等,探讨TRAIL对HXO-RB44细胞的增殖抑制作用。通过研究TRAIL与DDP联合应用对HXO-RB44细胞的增殖抑制作用,探讨TRAIL与DDP联合化疗方案如何减少药物的用药剂量,增强药物疗效,并为临床应用提供细胞学研究依据。方法：体外培养人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-RB44细胞,采用对数生长期的细胞进行实验。TRAIL以五种不同浓度(10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、500ng/ml), DDP以四种不同浓度(1.0mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L和50.0mg/L),分别单独作用于HXO-RB44细胞,在24小时、48小时、72小时后,用MTT比色法检测相应的肿瘤细胞增殖抑制率,并观察在不同时间段TRAIL与DDP对细胞形态及凋亡的影响。根据上述实验结果,选取对HXO-RB44细胞有明显抑制作用的TRAIL浓度T(200ng/ml TRAIL)和DDP浓度D(10.0 mg/L DDP)为基准,分别设计三种浓度梯度为：1/2T、T、2T,1/2D、D、2D,分别作用于HXO-RB44细胞,并分别在24小时、48小时、72小时后,用流式细胞术PI单染法测定细胞周期变化,TUNEL法检测细胞凋亡的情况。倒置显微镜下观察HXO-RB44细胞的微观形态学改变。选用T浓度TRAIL作用48小时的HXO-RB44细胞进行透射电镜观察。取TRAIL(T代表200ng/ml TRAIL的浓度)与DDP(D代表10.0 mg/L DDP的浓度)分别配成四种方案,即实验组(T+1/2D、T+D、1/2T+D、2T+D),并设阴性对照组和阳性对照组(D、1/2T、T、2T),以上各组分别作用于HXO-RB44细胞,分别在24小时、48小时、72小时后,用MTT法检测细胞增殖抑制率。结果：一、TRAIL作用于HXO-RB44细胞对其增殖抑制作用较为明显。TRAIL浓度为200ng/ml时,细胞抑制率明显增加。TRAIL作用于HXO-RB44细胞48小时对该细胞的增殖抑制率最大,之后细胞增殖抑制率有下降趋势。流式细胞仪细胞周期检测显示：TRAIL作用24小时、48小时、72小时后G2/M期、G0/G1期及S期细胞所占比率,分别与对照组比较,差异缺乏统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪TUNEL法检测细胞凋亡显示：100ng/ml TRAIL作用于HXO-RB44细胞24小时、48小时、72小时后,细胞凋亡率分别是：3.13%±0.09%、26.17%±1.04%、50.04%±0.91%、200ng/ml*TRAIL作用于HXO-RB44细胞24小时、48小时、72小时后,细胞凋亡率分别是：3.43%±0.37%、29.25%±0.67%、58.91%±0.2%。400ng/ml TRAIL作用于HXO-RB44细胞24小时、48小时、72小时后,细胞凋亡率分别是：23.89%±0.85%、51.65%±1.06%、60.32%±0.63%。三个TRAIL实验组的细胞凋亡率在48小时、72小时均高于对照组,两两比较差异有统计学意义(P<0.01)。相同TRAIL组在不同时间点的细胞凋亡率两两比较差异有统计学意义(P<0.01)。随着TRAIL浓度的增加和作用时间的延长,细胞凋亡率增加,呈量效时效相关性。倒置显微镜下观察：细胞逐渐减少甚至稀疏,粘附成团的细胞结合力下降,出现松散漂浮个体。随着用药浓度的增加和作用时间的延长,细胞有越来越稀疏的趋势。透射电镜下观察：细胞核发生染色体边集、固缩,新月体形成,电子密度增强,线粒体体积增大,肿胀呈空泡状,可见细胞丫生出泡现象,形成典型的凋亡小体。二、MTT法检测不同药物浓度方案在24小时、48小时、72小时后对HXO-RB44细胞的增殖抑制率显示：实验组TRAIL与DDP搭配的治疗方案,细胞抑制率均有明显提高,分别与单独应用TRAIL和DDP的阳性对照组比较显著性差异有统计学意义(P<0.01)。其中TRAIL(200ng/ml)+ DDP(10ug/ml)组在24小时、48小时、72小时的抑制率明显优于其他三组,实验组组间两两比较显著性差异有统计学意义(P<0.01)。阳性对照组和四个实验组的细胞增殖抑制率均在48小时时最大,之后有下降趋势。结论：1. TRAIL对HXO-RB44细胞有增殖抑制作用,48小时内抑制作用随时间延长而增大,其后抑制作用有逐渐降低趋势。2. TRAIL对HXO-RB44的细胞周期没有明显的影响。3. TRAIL可诱导HXO-RB44细胞凋亡,细胞凋亡率随药物作用时间的延长及用药浓度的增加而增大。4. TRAIL与DDP联合应用时,可增强DDP对HXO-RB44细胞的细胞毒活性,减少其药物剂量,降低其毒副反应,提高肿瘤细胞对TRAIL的敏感性,两药有协同抗肿瘤的作用。