工业化抗生素废水处理厌氧颗粒污泥种群分析研究

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厌氧颗粒污泥是工业化废水厌氧处理反应器高效稳定运行的关键,针对厌氧颗粒污泥种群进行分析研究,对于工业化废水厌氧处理工艺的运行和改进具有重要意义。为了研究抗生素废水对厌氧颗粒污泥种群结构的影响,选取石家庄若干实际运行的工业化废水厌氧处理反应器,采用PCR-DGGE技术对厌氧污泥样品进行了种群多样性分析和比较。本研究对PCR-DGGE技术的核心环节进行了方法的优化;以污泥样品中种群的Shannon多样性指数(H’)、Margalef丰富度指数(DMg)和Berger-Parker优势度指数(d),作为比较指标分析了污泥样品的种群多样性;通过添加已知细胞密度的基因工程菌,定量的考察了优势种群的细胞密度。研究获得了以下结果:根据工业化废水处理反应器污泥特性,对常规的溶菌酶-SDS-酚/氯仿环境样品总DNA提取方法进行改进,获得了一种工业化废水处理厌氧污泥总DNA提取的通用方法;对PCR-DGGE试验的条件进行优化,找到了最佳试验条件:采用降落PCR,引物加GC夹,DGGE最佳电泳条件为电压60 V,时间12.5 h,采用EB染色法染色。反应器处理废水水质形成的环境筛选效应对污泥菌群多样性具有重要影响;与城市生活污水相比,处理工业发酵废水特别是抗生素废水的厌氧污泥,菌群多样性和丰富度降低但具有较高的优势度;厌氧污泥颗粒化后,有助于保持污泥菌群多样性和丰富度;小试反应器运行环境的单一性和稳定性强化环境筛选效应,因此工业化反应器比小试反应器污泥菌群多样性水平和丰富度高。参照已知细胞密度的基因工程菌,定量的计算出了污泥样品中优势种群的细胞密度,结合计算数据和DGGE图谱证明了DGGE只能检测到细胞密度在104cfu·mL-1以上的优势种群。
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