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目的：探索睾丸支持细胞和骨髓干细胞的分离和体外培养技术；观察睾丸支持细胞对骨髓干细胞生长、增殖的影响；观察睾丸支持细胞和全反式维甲酸对骨髓干细胞向精原细胞分化的影响。
方法：二步酶消化和Tris-HCl低渗法分离12-16d SD大鼠睾丸支持细胞，免疫组织化学方法检测支持细胞FasL的表达；全骨髓贴壁法分离青年雄性SD骨髓干细胞；用MTT比色法检测支持细胞、骨髓干细胞的存活及增殖情况，并观察睾丸支持细胞与骨髓干细胞共培养对骨髓干细胞生长、增殖的影响；用RT-PCR检测精原细胞特异表达基因stra8 mRNA的表达情况，用免疫组织化学的方法检测c-Kit的表达情况，观察睾丸支持细胞和全反式维甲酸(ATRA)对骨髓干细胞向精原细胞方向分化的影响。
结果：
1.成功分离睾丸支持细胞，台盼蓝染色计数细胞存活率为92.5％；分离后所获取的支持细胞FasL免疫组化阳性细胞数均值为93.2％；睾丸支持细胞在含10％NBS的DMEM中培养48h增殖达高峰，并维持在该水平至168h。
2.成功分离骨髓干细胞；骨髓干细胞在含10％FCS的DMEM中培养144h时增殖达到高峰，并维持在该水平至168h。
3.睾丸支持细胞在120h前都能促进间接共培养骨髓干细胞增殖，共培养120h后骨髓干细胞存活明显下降。
4.ATRA组、共培养组、ATRA+共培养组骨髓干细胞都能表达转分化为雄性生殖细胞的分子标志stra8 mRNA和c-Kit，而对照组不表达。
结论：
1.二步酶消化和Tris-HCl低渗法是分离睾丸支持细胞的有效方法。睾丸支持细胞表达FasL，可以离体增殖存活。
2.全骨髓贴壁法是分离骨髓干细胞的有效方法；骨髓干细胞可以离体存活。
3.睾丸支持细胞可以通过释放可溶性因子调节共培养骨髓干细胞的体外生长与增殖，具有前期促进增殖后期引起细胞数量下降的双相作用。
4.睾丸支持细胞可以通过释放可溶性因子促进间接共培养的骨髓干细胞向精原细胞方向分化，ATRA可以促进培养的骨髓干细胞向精原细胞方向分化。