羊肚菌(Morehella spp.)是一种著名的食药用真菌,具有广阔的开发利用前景,近年来已有不少半人工栽培成功的案例,但至今羊肚菌的完全人工栽培还没有很大的突破。本论文在陕西省微生物研究所研究的基础上,对羊肚菌的人工栽培作了进一步研究。主要从人工仿生栽培和扩大羊肚菌的产孢量、增加其生物量进而促进出菇两个角度出发,试图为羊肚菌的生产化栽培探索一些新的途径。主要研究方法及结果如下：(1)从M1、M2和M3三种羊肚菌菌株中筛选出了最具生成子实体潜力的优良菌株M3,并确定最佳栽培种培养基为配方D。即：木屑65%,麸皮20%,松针粉10%,蔗糖1%,石膏1%,磷酸二氢钾0.1%,VB110mg/kg,新鲜蒜苗浸出液,料液比1：1。(2)从八种产孢培养基中筛选出了有利于M3菌株孢子生成的最适培养基b3。即：可溶性淀粉2%,蔗糖1%,硝酸钾1%,磷酸二氢钾0.5%,硫酸镁0.5%,氯化钠0.5%,碳酸钙0.5%,硫酸亚铁0.01%,琼脂2%,pH7.0。并通过正交实验,进一步优化M3菌株的最适产孢条件和最佳培养条件。即B3：可溶性淀粉2%、葡萄糖2%、蛋白胨1%、磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.5%、氯化钠0.5%、碳酸钙0.5%、硫酸亚铁0.01%、琼脂2%,最适pH7.0,最适培养温度20℃。(3)本实验选用的四种碳源和氮源均对M3菌株的含孢量和萌发率有一定的影响。其中,葡萄糖对提高M3菌株含孢量有最为明显的效果,蔗糖次之,添加淀粉时效果最差,但在添加淀粉时,M3孢子的萌发率得到了显著的提高。可见,只有在葡萄糖和淀粉的比例得当的情况下,才能在提高M3菌株含孢量的情况下,有效地促进其孢子的萌发。在本试验的四种供试氮源中,硝酸钾对提高M3菌株的含孢量效果最好,添加蛋白胨时含孢量的提高程度不甚明显,但在该条件下,M3孢子的萌发率得到了显著的提高,硝酸钾效果次之。因此,在生产上,调节硝酸钾和蛋白胨的适宜的比例水平对M3菌株的孢子形成和萌发具有同等重要的意义。(4)本研究设计并进行了不同的外界环境对M3菌株含孢量和孢子萌发率影响的相关实验。结果表明,培养温度为15℃时M3菌株的含孢量得到明显的提高,但在该温度下其孢子萌发率受到了显著的抑制。高于20℃的培养温度对提高孢子的含孢量很不利。在本实验的四个供试温度下,20℃时M3孢子的萌发率得到显著地提高。培养基的pH值对M3菌株含孢量的影响与其对孢子萌发率的影响趋势大体保持一致,pH值为7时,M3菌株的含孢量和M3孢子的萌发率均达到较高水平,pH在8左右时含孢量和萌发率均最低,可见,偏碱性环境对M3菌株的孢子生成和萌发具有不利的影响。(5)本实验进一步研究了添加外源营养对M3菌株孢子粉的含孢量和萌发率的影响。四种供试碳源对M3菌株的含孢量和孢子萌发率均有一定的影响,其中,蔗糖对提高M3菌株的含孢量具有最好的效果,淀粉对提高其含孢量的效果最差,但对提高M3孢子萌发率的效果最为明显。四种供试氮源对M3菌株的含孢量和孢子萌发率也有不同影响,添加硝酸钾能显著提高M3菌株的含孢量,添加蛋白胨能显著提高M3孢子的萌发率,尿素是四种供试氮源中效果最差的,对M3的含孢量和萌发率的影响最不明显。(6)本实验还研究了逆境条件下M3菌株孢子粉的含孢量和萌发率的变化。实验结果表明,在高温处理、紫外线照射、限制营养等条件下,所制得的M3孢子的活孢率和萌发率均明显下降,与对照相比存在显著差异。因此,在制备优质的M3孢子粉时,必须考虑所使用的培养基其中的营养是否能够满足孢子的生成和萌发条件。此外,适宜的外界环境条件也对M3菌株孢子生成和萌发有至关重要的作用；高温和紫外线处理对羊肚菌孢子均有一定程度的损伤,降低了孢子的活孢率和萌发率。生产上进行羊肚菌的人工仿生栽培时,应注意保持合适的环境温度条件,还应考虑环境中紫外线可能对其产生的影响。(7)最后,本实验制备了八种不同的羊肚菌菌剂。其中,羊肚菌子实体干粉和由PDA液体培养基发酵产生的菌丝体冻干产物均不产生孢子。与野生M3孢子粉的含孢量相比,液体发酵和固体平板培养所制得的菌剂平均含孢量均较低,且平板培养制得的菌剂均比液体发酵制得的菌剂平均含孢量高。但在添加外源的碳源或氮源以后,二者的平均含孢量较之前均有所提高。与野生M3孢子粉的萌发率相比,羊肚菌子实体干粉和由PDA液体培养基发酵产生的菌丝体冻干产物萌发率均较低。液体发酵和固体平板培养所制得的菌剂萌发率均介于M3子实体干粉及菌丝体干粉和野生孢子粉之间,且平板培养制得的菌剂均比液体发酵制得的菌剂萌发率低。但在添加外源的碳源或氮源以后,二者的平均萌发率较之前均有所提高。