柴油废气颗粒的吸入对哮喘大鼠迟发相反应的影响

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目的:探讨柴油废气颗粒(diesel exhaust particle DEP)的吸入对哮喘大鼠迟发相反应的影响。方法:选择Wistar雄性大鼠60只,随机分为六组,每组各10只。B组为哮喘模型组,利用新鲜配制100mg卵清白蛋白(ovalbumin OVA)+100mg氢氧化铝复合物共1ml于第1,8,15天做腹腔注射致敏,第22天开始给予3%卵清白蛋白+生理盐水溶液雾化吸入,每天一次,每次30min,连续7天。A组为正常对照组,以生理盐水代替OVA进行攻击,步骤同B组。观察组分C,D,E,F组,各组分别给予OVA攻击,步骤同B组。OVA攻击结束后各组分别雾化吸入DEP200μg/ml+生理盐水溶液各1、2、3、4周。DEP吸入结束后,过一周再用3%OVA+生理盐水溶液雾化吸入30min激发。用OVA激发后,经过24小时,各组再用乙酰甲胆碱(Methacholine MCH)进行支气管激发试验。测定每组大鼠气道阻力(RL)的变化,观察是否产生气道高反应性:观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒细胞(EOS)的计数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中IgE的浓度和肺组织中细胞因子(IL-5、IFN-γ)水平的变化;观察肺组织病理形态学变化。结果:①A组未发生气道高反应性B、C、D、E、F组在行支气管激发试验后组气道阻力(RL)比值比正常对照组增高,比较差异有统计学意义(F=104.472,P<0.01),E、F组与B组大鼠气道阻力比值比较差异有统计学意义(P<0.01),且DEP的吸入时间与气道阻力比值呈正相关(r=0.886,P<0.01)。②B、C、D、E、F组支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞(EOS)占细胞总数的百分比显著高于A组,比较差异有统计学意义(F=54.411,P<0.01)。从DEP吸入1周(C组)开始嗜酸性粒细胞的浸润逐渐增多,E,F组与B组比较差异有统计学意义(P<0.01)。③血清中IgE浓度在B、C、D、E、F组比A组明显增高,比较差异有统计学意义(F=6.071,P<0.01),C,D,E,F组与B组比较IgE浓度无明显差异性(P>0.05)④B、C、D、E、F组肺组织IL-5水平与A组比较明显增高。比较差异有统计学意义(F=23.667,P<0.01),D,E,F组与B组比较差异有统计学意义(P<0.01),且DEP的吸入时间与IL-5水平呈正相关(r=0.583,P<0.01);B、C、D、E、F组肺组织IFN-γ水平与A组比较明显降低,比较差异有统计学意义(F=33.229,P<0.01),E,F组与B组比较差异有统计学意义(P<0.01),且DEP的吸入时间与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.550,P<0.01)。⑤肺组织病理切片中可以看到A组上皮细胞完整,气道周围未见炎症细胞的浸润,以纤毛柱状上皮细胞为主,仅有少量的杯状细胞,基底膜未见纤维化.随着DEP的第1,2,3,4周的吸入,逐渐出现上皮细胞的坏死,中断,脱落,杯状细胞增生,气道周围的炎症细胞的浸润及基底膜的纤维化等改变。结论:柴油废气颗粒(DEP)的吸入能加重大鼠哮喘迟发相反应。
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