流感是由流感病毒引起的一种呼吸道传染性疾病,可以分为甲、乙、丙和丁四种血清型,其中流传最广、影响最大的为甲型流感病毒。甲型流感病毒具有发病率高、传播快、多宿主等特点,其中一些高致病性的人兽共患的病毒亚型还具有高死亡率的特点,对人类与动物的生命安全带来了巨大的威胁。预防流感主要依赖疫苗接种,但由于流感病毒具有变异快的特点,致使疫苗的研发具有滞后性,当新的病毒亚型出现时,难以及时有效地对易感人群提供防护。目前,临床上使用的抗流感药物主要有两类:M2离子通道抑制剂(金刚烷胺和金刚乙胺)和神经氨酸酶抑制剂(扎那米韦、奥司他韦和帕拉米韦)。金刚烷胺类已在临床应用多年,临床毒株已普遍耐药;奥司他韦等NA抑制剂的耐药报道也日益增多。现有疫苗与化药难以应对不断变化的流感疫情,因此,研究开发新型、广谱、高效的抗流感病毒药物十分迫切。路路通酸是从中药材路路通中提取得到的一种五环三萜类类化合物,文献报道其具有抗肿瘤、抗炎等药理作用,但有关路路通酸抗流感病毒的研究未见报道。本文建立了以A/PR/8/34(H1N1,PR8)流感病毒株感染犬肾细胞(Madin-Darby canine kidney cells,MDCK)的细胞感染模型,用间接免疫荧光法在从30余种五环三萜类化合物中筛选出有效化合物路路通酸,并用qRT-PCR法进一步确证路路通酸的抗流感病毒作用。同时建立了PR8感染人肺腺癌上皮细胞A549的细胞感染模型,综合应用终点稀释法测定病毒滴度、应用荧光免疫法检测病毒NP蛋白和RT-PCR检测病毒NP mRNA等实验,以确证路路通酸在A549细胞上对PR8增殖的抑制作用。结果表明,路路通酸在2.5~10μM浓度范围对PR8毒株的增殖有显著的持续的抑制作用,且呈剂量依赖关系;在20μM及其以下浓度路路通酸对A549细胞无毒。本论文设计了药物预处理细胞、同时作用及治疗作用3种作用模式,以初步确定路路通酸抑制了PR8复制的哪一阶段。结果表明,预防和治疗给药模式下,路路通酸对PR8的增殖均具有显著抑制作用。本论文还通过血凝抑制实验证实路路通酸不影响PR8的细胞吸附。本论文结果为路路通酸作为新型抗流感药物或先导化合物的研究提供了初步依据。