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背景:急性心肌梗死发病率死亡率高,严重威胁人类健康。溶栓或介入等治疗后缺血心肌的血流再灌注自身会引起心肌损伤,导致心脏预后不良。因此采取措施预防心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤对急性心肌梗死的治疗具有重要意义。尿石素B(Urolithin B,UB)是食物中的鞣花酸在肠道的代谢产物,具有抗肿瘤、抗炎症、抗氧化应激、类激素作用等药物活性。近年来的研究表明UB对动脉粥样硬化和糖尿病心肌损伤具有改善作用,但UB是否可以保护心肌缺血再灌注损伤尚不清楚。目的:探究UB对心肌缺血再灌注损伤的作用及其可能的分子机制。方法:(1)雄性Sprague Dawley大鼠结扎冠状动脉左前降支后复灌构建心肌IR模型,腹腔注射不同剂量UB。观察心肌内凋亡相关蛋白Cleaved Caspase 3表达变化,并检测最小有效剂量下药物的血浆浓度。(2)左心室插管记录IR期间血流压力变化;Evans Blue-TTC和HE染色观察心肌梗死面积和结构形态的改变;比色法检测心肌损伤因子CK、LDH、MDA含量和SOD活性;TUNEL及Western blot检测心肌细胞凋亡情况。(3)H9c2心肌细胞缺氧复氧(hypoxia reoxygenation,HR)建立HR细胞模型,并给予UB处理。MTT法检测HR和UB对细胞活性的影响;Western Blot及Annex V/PI双染检测UB对细胞凋亡的影响。(4)Western Blot和GFP-LC3腺病毒单标检测心肌组织及H9c2细胞内自噬水平及其上游通路Akt/mTOR/ULK1的变化。(5)给予Akt抑制剂LY294002后观察细胞自噬激活通路及细胞凋亡的变化。(6)荧光探针及Western Blot分别检测活性氧(ROS)含量及Nrf2-ARE通路激活情况;并检测p62/Keap1/Nrf2信号通路激活情况。(7)使用siRNA干扰Nrf2后,检测细胞内Nrf2下游蛋白表达、ROS含量及细胞凋亡的变化情况。结果:(1)0.7 mg/kg的UB可显著抑制IR心肌Cleaved Caspase 3的表达(P<0.05),该剂量血药浓度峰值约15.8μM。(2)与IR大鼠相比,UB显著升高左心室舒张末压(LVEDP),降低左心室收缩压(LVSP)、等容收缩期左室内压上升段最大变化速率(+dp/dt max)、左室内压下降段最大变化速率(-dp/dt max)(P<0.05);减心肌小梗死面积并改善结构紊乱;降低LDH、CK、MDA的表达并增强SOD的活性(P<0.05);抑制IR诱发的心肌细胞凋亡(P<0.05)。(3)UB显著抑制HR导致的细胞活性降低和细胞凋亡(P<0.05)。(4)UB显著抑制IR/HR激活的自噬,上调p-Akt(S473)、p-mTOR(S2448)、p-ULK1(S757)、p62的表达,降低LC3Ⅱ/Ⅰ的表达(P<0.05)。(5)LY294002阻断UB的自噬抑制后,UB抑制细胞凋亡的作用消失(P<0.05)。(6)UB减轻IR/HR模型内ROS的含量、促进Nrf2的核转位并上调HO-1、NQO1、GSTP1蛋白的表达(P<0.05);HR导致与Keap1结合的p62减少,而UB增加二者的结合水平。(7)Nrf2表达被抑制后UB上调抗氧化蛋白表达、降低ROS含量、抑制细胞凋亡的作用被逆转(P<0.05)。结论:(1)UB具有抗心肌缺血再灌注损伤作用。(2)自噬抑制参与调节UB抗心肌缺血再灌注损伤。(3)UB通过p62/Keap1/Nrf2信号通路激活Nrf2发挥抗心肌缺血再灌注损伤作用。