目的本研究通过对胃癌组织及其邻近的癌旁组织miRNA-188-5p和LAPTM4B表达的检测,分析miR-188-5p和LAPTM4B表达的相关性。探讨LAPTM4B是否为miR-188-5p的靶基因,分析miR-188-5p靶向调控LAPTM4B抑制mTOR的作用机制及其在胃癌细胞的增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭等生物学过程发挥的作用。方法收集滨州医学院附属医院病理科经外科治疗的12例胃癌患者的癌组织,并收集其邻近的癌旁组织作为对照。患者在手术治疗前没有进行任何与胃癌治疗相关的药物或物理治疗,术后所有患者通过回访中心电话随访;选择极易转染的293T细胞作为双荧光素酶报告基因实验表达载体的细胞;选择SGC7901细胞株作为探讨miR-188-5p对LAPTM4B基因作用机制的研究对象。(1)采用 RT-qPCR 检测 miR-188-5p 及 LAPTM4B mRNA 的表达(2)IHC、Western blot检测LAPTM4B及mTOR相关蛋白的表达(3)采用双荧光素酶报告基因验证miR-188-5p对LAPTM4B基因的直接靶向调控作用(4)采用MTT法和平板克隆形成、Transwell法、流式细胞术分别检测miR-188-5p对胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭、凋亡、周期等生物学行为的影响结果(1)与其癌旁组织相比,miR-188-5p在胃癌组织的表达明显下调。(2)与其癌旁组织相比,LAPTM4B及LAPTM4B mRNA在胃癌组织的表达明显上调。(3)在胃癌组织中,miR-188-5p与LAPTM4B表达呈负性相关。(4)双荧光素酶报告基因结果显示,LAPTM4B是miR-188-5p靶基因,miR-188-5p通过与LAPTM4B3’-UTR的特定位点结合来发挥对LAPTM4B基因的靶向抑制作用。(5)在 SGC7901 细胞中转染mimic-miR-188-5p 后,抑制 LAPTM4B 蛋白与 mTOR相关蛋白的表达,而转染inhibitor-miR-188-5p后的结果与转染mimic-miR-188-5p的结果相反。(6)mimic-miR-188-5p 转染至SGC7901 细胞后,MTT、平板克隆形成、Transwell、流式细胞术等实验结果显示,miR-188-5p抑制细胞的增殖、迁移、侵袭,G1期细胞向S期转化,促进了细胞的凋亡,而转染inhibitor-miR-188-5p后的结果与转染mimic-miR-188-5p 的结果相反。结论miR-188-5p靶向调控LAPTM4B,抑制mTOR相关蛋白的激活,抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期G1期向S期转化,促进胃癌细胞的凋亡。