基于酶循环放大技术检测肿瘤标记物的研究

来源 :青岛科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:www478478
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,癌症发病率不断增长,造成的死亡人数逐年增加,已经成为严重威胁人类生命健康的一类重大疾病。由于对肿瘤等的早期病变缺乏准确灵敏的检测方法,而且现有的检测手段价格昂贵、操作较为复杂,所以寻找更高效、简捷的检测方法对肿瘤的预防、诊断、治疗和疗效观察等具有重要的研究价值。本论文主要采用了具有SERS活性的核-壳结构生物条码探针、纳米技术、滚环复制的酶循环放大等技术,使得检测信号得到放大,通过表面增强拉曼检测、电化学检测等方法,实现了对肿瘤细胞、蛋白质、基因和生物活性小分子等肿瘤标记物的高特异性和高灵敏度检测。以下是论文包含的主要内容:1.设计了一种以CdS修饰的生物条形码-AuNP作为探针,基于双链特异性核酸酶具有极高的选择性,能识别并剪切完全匹配的DNA双链、杂交的RNA/DNA双链中的DNA,所以DSN特异性选择和切割使CdS修饰的生物条形码-AuNP释放到溶液中。通过生物条码放大技术固定CdS纳米粒子,结合阳离子阳极溶出伏安(ASV)预富集技术显著提高检测的灵敏度。该传感器还可以应用于含有mRNA的样品检测中。应用此检测方法,可以实现mRNA的高灵敏度和高选择性的测定,得到检测mRNA的线性范围是5.0×10-16~1.0×10-10M。线性相关系数R2=0.997,检测限是1.0×10-16M(3σ)使用本传感器获得的检出限低于文献很多倍。同时对传感器的选择性和重复性进行了研究,通过此传感器,可以实现mRNA的分析和检测。2.基于生物条码技术和酶循环放大技术,采用表面拉曼增强技术,设计了一种高灵敏检测凝血酶的检测技术方法,构建了一种新型的DNA循环信号放大分子生物传感器,把表面增强拉曼光谱技术应用到DNA循环放大的检测方法中。把核-壳结构作为拉曼信号分子和增强信号的底物,制备了一种携带有大量拉曼信号分子的核-壳结构的生物条码作为拉曼信号探针。在靶DNA的存在下,引发了DNA的循环放大和滚环复制,产生了大量的含有重复序列的DNA长链,可与拉曼探针杂交,从而实现了对DNA的循环放大检测,并进一步通过检测凝血酶验证了该方法的通用性。凝血酶浓度检测的线性范围为1.0×10-9~1.0×10-5M,检测限为1.0×10-10M(3σ)。该方法操作简单,灵敏度高,在肿瘤标志物蛋白和其他领域中都具有较好的选择性,具有广阔的应用前景。
其他文献
目的:探讨钙通道阻断剂硝苯地平对糖尿病患者血小板聚集(platelet aggregation,PAG)功能和血小板胞质游离钙(血小板[Ca2+]i)的作用。方法:用比浊法测定PAG,Fura-2荧光测钙技
<正>编写自己的应用程序,创建游戏台,设计一辆汽车,然后把它打印出来,在黑暗中拍摄照片,给你的房子装上一个智能大脑……这些能让大脑升级的东西在过去只能购买,如今我们都可
通过对山东省中小学学校体育现状进行抽样调查和分析研究 ,摸清了山东省中小学体育课开课、课余训练、体育师资队伍、体育教学物质条件等方面的现状 ,并提出了解决问题的方案
调车作业智能化指挥系统的核心功能是指系统应具备的本质性关键功能,主要包括钩计划编制功能、作业优化功能,以及体现指挥可调性和系统适应性的柔化功能3个部分.探讨这些核心
<正>坝河西安两栖犀(Sianodon bahoensis)的初步简报,已在“古脊椎动物与古人类”第九卷第一期上发表(徐,1965)。这里再将这些材料,特别是头骨及下颌骨,作较详细的描述和对比
会议
期刊
目的探讨血液透析患者深静脉置管的感染原因及护理方法。方法回顾性分析92例血液透析患者的临床资料,根据置管部位、导管留置时间、是否合并糖尿病、营养状况、年龄等因素分
我国高等教育可分为研究型高等教育、学术型高等教育和应用型高等教育,应用型高等教育是经济社会发展和高等教育大众化的必然结果。应用型高等教育的人才培养方案应遵循社会
配电台区的电力线路径采用分支开关中继接力或转接时,由于配电网供电负荷的波动性和网络环境的复杂性,传统的单一通信方式无法满足分支开关信息采集需求。因此针对电力线路径
我国地理标志保护是涉及"三农"问题的一项特殊知识产权,关系到农民的切身利益。目前我国大多数公民还不懂得通过地理标志保护来维护属于自己的权益,开展农产品地理标志保护知