论文部分内容阅读
重点对三倍体无籽西瓜成熟胚无菌萌发，愈伤组织诱导、继代、分化以及植株再生等进行了系统的研究，建立了高效愈伤组织扩繁体系，为无籽西瓜体细胞胚诱导、体细胞遗传变异特性及细胞工程研究奠定了基础。主要试验结果如下： 1．无籽西瓜成熟胚消毒的最佳方案是先用75％酒精预消毒30s，然后用10％漂白粉+0.5％NaClO消毒30 min，再用无菌水冲洗3～5次。消毒胚平放于蛭石或琼脂培养基中，先暗培养3d再转至培养室，胚萌发很快，无菌苗生长健壮。无籽西瓜不同品种与成熟胚的萌发生长没有必然的联系，只要给予适宜的光、温、水、气条件，不同品种的成熟胚均可正常萌发。 2．适宜诱导愈伤组织的外植体是2～6d苗龄的无菌苗子叶和下胚轴，最佳培养基组合为MS+NAA 1.0mg／L+BA0.5 mg/L。无籽西瓜愈伤组织的产生首先需要黑暗条件的启动，其扩增与生长分化则需在光下进行；接种后直接进行光照处理，抑制愈伤组织形成。品种与愈伤组织诱导关系密切，在C24（MS+NAA 1.0mg/L+BA0.5mg/L）培养基中“黑蜜5号”是最易产生愈伤组织的品种，可作为无籽西瓜体细胞诱导等方面研究的理想材料。 3．不同糖源对无籽西瓜下胚轴愈伤组织诱导的作用存在显著差异，其中蔗糖效果最好，葡萄糖次之，乳糖和麦芽糖差异不明显，而山梨糖效果最差。蔗糖浓度影响无籽西瓜下胚轴愈伤组织的诱导，浓度超过3％时诱导率呈下降趋势；但适当提高蔗糖浓度有利于愈伤组织的进一步分化，能促进颗粒状愈伤组织的形成。从诱导率和愈伤组织质地综合考虑，蔗糖浓度以5％为佳。加速愈伤组织增殖时，可以适当降低蔗糖浓度，蔗糖浓度2％最有利于“黑蜜5号”无籽西瓜愈伤组织的继代扩增。；＆．愈伤组织芽分化的最佳培养基组合是MS＋BA4．oms／L”NAno·sins／， 芽分化率高达 7 5％。丛状芽诱导的理想培养基组合是 MS＋BAZ．oms／L＋IBAO．sins／L和MS＋BAZ．0。s／L＋IBAI．0。s／L，丛芽增 殖倍数均超过8，有效芽率高达93．52％以上，基部没有愈伤组织产生。 MS培养基中附加 0．Zing／L，0．sing／L，1．omg／L的 KT均可明显促进矮 弱芽苗的生长发育卜 5．无根芽苗在附加 IAAO．4 ms＊或 IBAO．3 ms／L的 1／ZMS培养基 中生根都很理想，生根率均达到100见 平均根数在4．38条以上，且 无根芽苗基部没有愈伤组织产生。生根苗先闭瓶炼苗6～sd，后移栽到 经过消毒的自然蛙石＋草炭门：2八：V)中，移栽成活率可达 97．5？以上。