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普瑞巴林（Pregabalin），化学名（S）-3-氨甲基-5-甲基己酸，是美国辉瑞公司研制开发的一种氨基丁酸（GABA）受体激动剂，临床用于抗神经痛、焦虑症以及成人部分癫痫症的辅助治疗。目前，在众多普瑞巴林合成路线中，化学-酶法将传统化学方法与现代生物催化法将结合，成为近年来制备普瑞巴林的研究热点之一。（S）-3-氰基-5-甲基己酸是化学-腈水解酶法合成普瑞巴林的关键手性中间体，以异丁基丁二腈（IBSN）为底物，通过产腈水解酶微生物的选择性催化，可制备（S）-3-氰基-5-甲基己酸。首先，本文通过化学合成法制备腈水解酶选择性催化的底物IBSN，以异戊醛和氰基乙酸乙酯为原料，经Knoevenagel缩合、氰基加成及高温脱羧三步反应合成IBSN；通过对原料配比、反应温度、反应时间等反应条件的影响进行考察和优化，总收率由一锅法的62.3%提高至81.4%。通过1H NMR、13C NMR、MS、FT-IR对反应产物的结构进行了表征，确认了其结构的正确性。其次，以外消旋体异丁基丁二腈（IBSN）为底物，通过氯化钴显色法初筛、苯酚-次氯酸钠显色法复筛，最后通过手性气相色谱法终选，最终筛选到一株能够将IBSN选择性催化为（S）-3-氰基-5-甲基己酸的菌株，经鉴定为假单胞菌，并命名为Pseudomonas8，同时，通过1H NMR、13C NMR、HMQC、FT-IR以及MS对催化产物进行结构确认。最后，对Pseudomonas8选择性催化IBSN条件进行了研究，系统地考察了催化反应中的温度、时间、缓冲液pH、菌体浓度、底物浓度、表面活性剂、有机助溶剂等因素对催化反应的影响，得出以下结论：该腈水解酶选择性催化反应的最佳条件为20mM底物浓度，2.0g/L（干细胞重，DCW）菌体浓度、添加5%（w/v）表面活性剂TritonX-100至pH为7.0的PBS缓冲液中，30℃，反应12h，转化率和eep值分别达到57%和67%。