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为了进一步揭示戊型肝炎病毒(HEV)与肠道黏膜免疫屏障的相互作用,本研究应用新西兰大白兔及长爪沙鼠作为HEV的感染的动物模型,目标锁定HEV相关抗原在肠道组织中的定位及其对肠道黏膜免疫的影响,采用组织病理学、组织细胞化学、免疫组织化学、PCR等方法,全面系统地观察兔及沙鼠感染HEV后,肠道结构,肠道黏膜免疫相关细胞的数量及黏膜免疫相关因子表达,揭示了HEV侵入过程中肠道免疫细胞间及局部黏膜免疫功能之间的关系,进而阐明黏膜免疫相关细胞和分子在HEV感染中的功能作用。试验结果如下：1、兔源HEV感染家兔试验兔源HEV腹腔感染兔后,呈现不同的感染类型,感染后血清、粪便均可检测到]HEV RNA,血清中可检测到HEV ORF2抗原,同时肝脏也表现出与人HEV感染相似的病理变化；HEV感染兔全身组织器官HEV RNA及ORF2抗原检测结果显示,兔源HEV RNA及ORF2抗原可在感染兔不同组织器官(肝脏、脾脏、肺脏、淋巴结、十二指肠、空肠、回肠、圆小囊、蚓突)中分布,并且当粪便内存在HEV RNA时,肠道及肠相关淋巴组织可呈HEV抗原阳性；免疫组织化学观察结果表明：HEV ORF2抗原阳信信号主要分布于肠道黏膜上皮细胞、肠腺上皮细胞胞浆及圆小囊及蚓突的圆顶上皮M细胞胞浆中,而HEV ORF3抗原阳信信号主要成片分布于肠道黏膜上皮细胞、肠腺上皮细胞胞浆中,呈颗粒状分布于肠道管腔面,圆顶上皮细胞胞浆顶端及淋巴滤泡内的滤泡成纤维网状细胞中。2、猪源HEV感染沙鼠试验猪源HEV感染沙鼠后,沙鼠粪便及肠道组织在不同时间点均能检测出HEV RNA,且肠道呈HEV ORF2抗原阳性,阳性信号主要分布于肠道上皮细胞、肠腺上皮细胞胞浆中；沙鼠肠道形态与结构的观察与分析表明：HEV感染后沙鼠肠道杯状细胞数量未出明显变化。攻毒后7天及14天,攻毒组沙鼠十二指肠绒毛长度和回肠隐窝深度值显著下降(p<0.05)。而攻毒后第21及28天,沙鼠肠道绒毛长度及隐窝深度值均有回升。层粘蛋白免疫组织化学显示HEV感染后沙鼠肠道黏膜基底膜的层粘蛋白表达量没有显著变化。HEV感染后沙鼠肠道黏膜免疫相关指标的观察结果表明：肠道派尔氏结及上皮内淋巴细胞数量均有不显著的升高,肠道总的肥大细胞数量在感染后21天及28天显著升高(p<0.05)。HEV感染后不同时间点,沙鼠肠道中IgA的表达量与对照组相比均显著升高(p<0.05)。肠道固有层树突状细胞数量在攻毒后21天及28天有所增加,尤其在攻毒后21天树突状细胞数量呈显著增加(p<0.05)。3、活体兔肠袢结扎感染试验HEV感染活体兔结扎的回肠及圆小囊后10min即可见回肠及圆小囊黏膜上皮中有HEV ORF2抗原表达,而且感染HEV后30min HEV ORF2抗原阳性信号比感染后10min显著增强。阳性信号主要分布于肠道黏膜上皮细胞、腺上皮细胞、圆小囊圆顶上皮细胞及少量的圆小囊淋巴滤泡中的单核细胞胞浆内。HEV感染活体兔结扎的圆小囊后24h,兔圆小囊的淋巴细胞刺激指数明显升高。活体兔结扎的回肠及圆小囊经抗sIgA抗体处理后再用HEV感染,圆小囊中的HEV ORP2抗原变化不明显,而回肠黏膜上皮细胞胞浆及其表面的HEVORF2阳性信号明显增多,表明肠道黏膜组织不仅仅是HEV侵入机体的门户,而且也是HEV繁殖的重要场场所。同时表明sIgA在肠道黏膜抗HEV感染免疫中担任了得要的角色,当其表达受到抑制时,HEV就易于感染上皮细胞,并很快在细胞内增殖。上述研究结果表明,HEV可以直接作用于肠道黏膜上皮,引起黏膜上皮细胞感染。感染HEV后,HEV RNA及其抗原在各段肠道及肠相关淋巴组织中广泛分布。HEV感染对肠道的结构有一定的损伤作用,同时能激发肠道黏膜免疫功能,使肠道内肥大细胞、树突状细胞的数量和sIgA的表达量增多。IgA在肠道黏膜抗HEV感染免疫中担任了重要的角色。