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1目的细胞移植治疗椎间盘退变目前尚处在实验室研究阶段,而骨髓间充质干细胞是最有潜能的种子细胞之一。通过SD大鼠骨髓间充质干细胞与退行性改变的髓核细胞体外共培养,探索大鼠骨髓间充质干细胞能否通过直接接触促进髓核细胞细胞外基质的表达以及髓核细胞能否诱导骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化。2方法运用密度梯度离心法和贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,流式细胞仪鉴定细胞表型符合骨髓间充质干细胞表型,培养至第3代冻存；采用酶消化法分离培养椎间盘髓核细胞,采用甲苯胺蓝蛋白多糖染色和Ⅱ型胶原蛋白免疫组化染色鉴定符合髓核细胞特征后,培养至第5代出现形态学退变后冻存。两种细胞复苏恢复生长活性后,取已自然退变的第6代髓核细胞与生长良好的第4代骨髓间充质干细胞按不同比例(75：25,50：50和25：75,细胞总数一致)体外共培养7d,单独髓核细胞(100：0)与单独骨髓间充质干细胞(0：100)分别作为阳性对照和阴性对照。甲苯胺蓝染色定性观察蛋白多糖含量,Ⅱ型胶原蛋白免疫组化检查,Ⅱ型胶原蛋白和蛋白多糖RT-PCR分析。3结果RT-PCR检测显示髓核细胞与骨髓间充质干细胞共培养组(75：25组和50：50组)细胞胞浆内Ⅱ型胶原蛋白和蛋白多糖表达量均明显高于单纯髓核细胞组(100：0),后者蛋白多糖表达量与髓核细胞与骨髓间充质干细胞共培养组(25：75)无明显差别,但Ⅱ型胶原蛋白表达量高于髓核细胞与骨髓间充质干细胞共培养组(25：75),而单纯骨髓间充质干细胞组(0：100)两者均无明显阳性表达。；髓核细胞与骨髓间充质干细胞共培养组(75：25和50：50)细胞胞浆内II型胶原蛋白表达较好,单纯髓核细胞组(100：0)阳性表达弱于上述两组,而与髓核细胞与骨髓间充质干细胞共培养组(25：75)无明显区别。蛋白多糖甲苯胺蓝染色显示共培养组(75：25和50：50)胞浆内异染性明显强于单独髓核细胞培养组(100：0)。形态学观察显示,共培养组中可见骨髓间充质干细胞由长梭形向多角形、类圆形转变,胞浆内异染颗粒增多。髓核细胞恢复生长活性,细胞外基质分泌增多。两种细胞充分混匀,因骨髓间充质干细胞体外扩增能力强,通过观察能发现在培养瓶底部局部形成髓核细胞-骨髓间充质干细胞小集落。4结论通过体外直接接触共培养,骨髓间充质干细胞能延缓甚至逆转髓核细胞退变,而且髓核细胞能诱导骨髓间充质干细胞向类髓核细胞转换。