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双酚A (BPA)是一种内分泌干扰物,影响生殖系统的发育。双酚A还可导致前列腺癌、神经系统和胰腺功能混乱。双酚A是一种重要的有机化工原料,被用于生产环氧树脂与聚碳酸酯类产品,而这两类产品在食品包装、食具、塑料瓶等方面应用广泛。双酚A在一定条件下会因溶出、迁移和排放等原因进入生态环境,进而对人体健康造成潜在危害。为此,建立一种快速检测双酚A的方法具有十分重要的意义。本文利用双酚A结构类似物为半抗原,采用碳二亚胺法将双酚A半抗原与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)等载体偶联合成双酚A免疫抗原,再将双酚A半抗原与多聚赖氨酸(PLL)、鸡血清白蛋白(OVA)偶联制备包被抗原。用双酚A免疫抗原免疫新西兰兔,以制备其多克隆抗体。选取最佳的免疫抗原免疫Balb/c鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞细胞SP2/0融合,经多次亚克隆筛选出高性能的单克隆细胞株。分别利用制备的多克隆抗体和单克隆抗体,建立了双酚A免疫分析方法。利用双酚A多克隆抗体,优化免疫分析条件,分别建立检测双酚A的酶联免疫分析吸附法和荧光免疫分析法。建立的酶联免疫分析方法线性范围为1.3ng/mL~292.2ng/mL,最低检测限是0.5ng/mL,样品加标回收率为86.7%-109.2%。用酶联免疫分析法研究西洋菜对双酚A的去除能力,结果表明对其去除效果较好。荧光免疫分析的的线性范围为2.4ng/mL~1279.5ng/mL,最低检测限是0.8ng/mL,样品回收率为89.3%-110.6%。由此可知,建立的酶联免疫分析方法的灵敏度更高。利用体内诱生腹水法制备双酚A单克隆抗体,优化免疫分析条件,建立检测双酚A的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法。其线性线性范围为0.9ng/mL~678.7ng/mL,最低检测限是0.3ng/mL,样品回收率为84.0%-106.0%。建立的生物素-亲和素放大体系具有更低的检测限与交叉反应,适于双酚A的痕量检测。