视网膜干细胞移植对大鼠视神经横断伤治疗的研究

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视神经损伤是临床上常见的致盲性疾病,通常会造成严重的不可逆的视功能障碍.随着社会的进步,这类疾病的发病率在逐年上升,但是致目前为止尚未有满意的治疗方法.其主要原因在于,视神经损伤导致了视网膜节细胞不可塑的死亡,而成年哺乳动物的神经细胞死亡后不具有再生能力.干细胞具有自我复制、多向分化和定向迁移等特点,干细胞的发现为此类疾病的治疗提供了可能的前景.该课程在人胚胎视网膜来源的R748B2细胞系细胞体外诱导分化的研究基础上,通过大鼠视神经部分横断伤模型的建立,研究了玻璃体腔内视网膜干细胞移植在大鼠视神经损伤治疗中的应用.研究中选用了GFP标记的R718B2人胚胎视网膜来源的永生化视网膜细胞系细胞及44只SD大鼠作为研究对象,对细胞系细胞在不同的条件下进行培养、诱导分化及免疫荧光化学染色鉴定;用其中16只大鼠分随机分4组进行视神经部分横断伤模型的FG塑行标记观察,其余28只分3组用于视网膜干细胞移植,全部眼球进行视网膜铺片或冰冻切片荧光显微镜下观察.通过上述结果,我们可以得出以下结论:1.R718B2细胞系细胞是一种多能的视网膜干细胞,能够在体外培养的条件下大量增殖,并在特定的诱导环境下向神经节细胞、双极细胞、无长突细胞及Muller神经胶质细胞等多种视网膜末细胞方向分化.2.视神经部分横断伤模型是一种效果稳定、可重复性强的动物模型,可导致神经节细胞的定向区域性死亡,应用到移植实验中具有自身对照的优势.3.R718B2细胞系细胞移植到视神经部分横断伤模型大鼠玻璃体腔中后,可以定向向受损伤的视网膜内迁移,并整合到视网膜节细胞层内,至少可以存活两周时间.
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