目的:观察双氢青蒿素(Dihydrartemisinin,DHA)对下咽癌Fadu细胞裸鼠异体移植肿瘤影响和对放射敏感性的影响,为双氢青蒿素抑瘤作用及放射增敏作用提供在体依据,进一步研究双氢青蒿素控瘤及其放疗增敏作用的机制,探究STAT3信号转导通路在这一过程中的调控作用,以期为抗肿瘤新药的开发奠定试验依据,探寻在头颈肿瘤下咽癌治疗的新方法、新策略。方法:取处于对数生长期的人下咽癌Fadu细胞悬液(0.2 ml,2~6×107个细胞)接种于裸鼠皮下,15天后取皮下移植瘤严格无菌操作下剪切为直径为1mm相同大小组织块接种到裸鼠右侧下肢皮下,构建荷瘤小鼠模型。肿瘤在体成活良好,2周后将20只肿瘤大小匀称的荷瘤小鼠随机分为空白对照组、双氢青蒿素组、单纯放射组、DHA+放射组(每组n=5)。双氢青蒿素组和DHA+放射组均每天给予浓度为50 mg/kg的10%DMSO溶解的DHA腹腔注射,空白对照组和单纯放射组每天给予同等浓度的10%DMSO腹腔注射,每组连续用药28天,用药时间为放疗前5小时。单纯放疗组和双氢青蒿素+放疗组采用隔日照射1 Gy,注意照射过程中用铅板遮蔽小鼠其他部位做到对重要脏器的保护,每周照射3次,总照射剂量为12 Gy。每日观察小鼠一般情况。28天后完全剥离出移植瘤。(1)隔日测量每只小鼠的重量,游标卡尺测量肿瘤的体积,处理完成后剥离瘤体测量移植瘤的体积和重量,计算抑瘤率和生长抑制率;并对肿瘤组织切片进行HE染色。(2)经处理的肿瘤组织应用流式细胞学分析,观察每组的肿瘤组织细胞周期分布情况和凋亡变化情况。(3)进行Western-blot实验分析双氢青蒿素联合放疗后STAT3、p-STAT3及相关凋亡蛋白和细胞周期蛋白的表达,分别检测p-STAT3、STAT3、Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果:1人下咽癌Fadu细胞悬液接种于裸鼠皮下,生长合适大小的肿瘤组织的同种异体移植到其他小鼠成功构建下咽癌裸鼠移植模型。2在干预过程中,空白对照组、双氢青蒿素组、放射组和放射+DHA组裸鼠一般情况良好,各组小鼠的生长状态无明显差异、未见明显药物或放射不良反应。3双氢青蒿素组相比空白对照组、双氢青蒿素+放射治疗组相比放射治疗组对下咽癌Fadu细胞的裸鼠移植瘤的生长抑制作用加大,且抑制程度的差异有统计学意义(P<0.05)。双氢青蒿素组、单纯放射组、联合应用放射和DHA组的抑瘤率分别为:40.74%、61.08%、80.09%;三组的生长抑制率分别为33.08%、53.06%、68.68%。4下咽癌Fadu细胞的裸鼠移植瘤的组织切片HE染色显示,DHA改变了肿瘤细胞的形态,对肿瘤细胞生长有抑制作用,比放射治疗作用小,放射治疗+双氢青蒿素呈现明显协同作用。5流式细胞学分析细胞周期显示放射导致G2/M期阻滞,联合应用放射和双氢青蒿素明显缩短G2/M期阻滞,G0/G1期、S期的阻滞增加(与放射组相比,P<0.05);流式细胞术检测细胞凋亡的结果显示:双氢青蒿素、放射均促进细胞凋亡(与空白对照组相比,P<0.05),联合放射和双氢青蒿素凋亡明显增加,与单纯放射组相比有统计学差异(P<0.05)。6 Western-blot实验检测各相关蛋白:总STAT3表达不随处理变化而变化;双氢青蒿素降低p-STAT3表达,放射组p-STAT3表达较对照组增加,联合双氢青蒿素和放射后,p-STAT3的表达明显下降;双氢青蒿素、放疗均降低Cyclin D1、Bcl-2的表达,在DHA+放射组中这些蛋白的表达明显下降,而Bax的表达情况则相反。结论:1双氢青蒿素对下咽癌Fadu细胞的裸鼠移植瘤有抑制作用。2对下咽癌Fadu细胞的裸鼠移植瘤,放射有较强抑制作用。3在下咽癌Fadu细胞的裸鼠移植瘤实验中,双氢青蒿素与放射具有协同抑制肿瘤作用,双氢青蒿素有放射增敏作用。双氢青蒿素有效的提高了经X线照射后的下咽癌Fadu细胞的裸鼠移植瘤凋亡率。双氢青蒿素明显缩短放射对G2/M期阻滞,增加了G0/G1期和S期的阻滞。使放疗抵抗得以降低。双氢青蒿素联合放射的作用机制可能与STAT3信号转导通路有关,STAT3及下游蛋白在双氢青蒿素放射增敏过程中发挥着重要的作用。