流产衣原体(C.abortus)可以导致妊娠母畜后期如牛、羊、猪的流产、死胎。流产衣原体也是一种人兽共患病原,接触过患病家畜的妇女也可发生流产、死胎。通常情况下,初次感染流产衣原体的羊群流产率达到30%以上,感染羊会发生流产、死胎、弱胎。在第二次产羔季节,未治疗的羊群流产率为5%-10%。疫苗作为预防传染性疾病的重要手段和措施,对预防动物性传染性疾病和保护人类健康安全起到了非常重要的作用。在研究牦牛衣原体灭活疫苗的过程中,发现流产衣原体灭活疫苗对牦牛衣原体的流产似乎具有某种治疗效果,具有大幅度降低流产率的作用。本研究建立荧光定量PCR(qPCR)对流产衣原体的检测方法。根据的胞质蛋白(envB)基因设计特异性引物,利用EnvB-PMD19T阳性质粒为参考标准品,优化了反应条件,进行了敏感性、特异性及重复性试验,检测了感染流产衣原体小鼠的菌体载量。以重组质粒为标准品建立的标准曲线在1×10~2 copies/μL~1×10~6 copies/μL内呈现良好的线性关系,扩增效率为97%。灵敏度试验表明,该检测方法的最低检出限低至10 copies/μL。组内、组间重复性试验的变异系数均小于2%,具有良好的重复性和稳定性。本研究利用Balb/c小鼠为试验模型,通过腹腔和消化道两种途径接种流产衣原体,用已经建立的实时定量PCR的方法对两种不同途径感染的小鼠进行检测,结果表明,脾脏、子宫、肝脏、十二指肠在感染14天时的流产衣原体菌体载量最高。两种途经感染小鼠的各个器官,同一时间内的IFU基因组拷贝数存在一定差异,但C.abortus在相同组织器官中的定植和繁殖规律完全相同,表明C.abortus对各组织器官的嗜性有明显的规律。本研究通过感染流产衣原体的Balb/c小鼠,对羊流产衣原体灭活苗治疗机制进行了初步的探讨。小鼠在感染流产衣原体后14天,进行疫苗注射。将试验组分为对照组0μL(C),低剂量组50μL(LD)和高剂量组100μL(HD),开展小鼠组织中菌体拷贝数检测,外周血抗体效价检测,组织病理切片和免疫组化观察,外周血细胞因子检测。结果表明,LD组与C组相比,菌体基因组拷贝数明显减少,免疫组化阳性标记率低,抗体滴度高;细胞因子在开始检测的一周时间内,HD组的抑炎细胞因子IL-4是逐渐下降,反之,LD组的IL-4是上升,而且要高于HD组和C组。HD组的促炎细胞因子IL-6、TNF-α要高于LD组和C组。除此之外,LD组的促炎细胞因子TNF-α并未检测到。上述结果表明,低剂量的灭活疫苗可以有效抑制感染小鼠体内的衣原体复制。综上所述,本研究成功建立了羊流产衣原体实时定量PCR方法,并在此方法的基础上证实衣原体灭活疫苗可以抑制感染小鼠体内的衣原体增殖。为更好的指导流产衣原体油乳佐剂灭活疫苗在临床上的使用具有重要的意义。