喉鳞状细胞癌中微卫星不稳定性及杂合性缺失的研究

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目的:本课题的主旨在于研究喉鳞状细胞癌中微卫星的不稳定性(MSI)及杂合性缺失(LOH)的发生情况,近而探讨其与喉鳞癌发生及发展的相关性,指导临床诊断与治疗。方法:选择3p14.1﹑5q23.1﹑9p22.1﹑11p15.4四个区域的微卫星位点,从喉鳞癌组织中提取特定的DNA基因组序列,进行聚合酶链反应,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-硝酸银染色分析MSI和LOH发生的情况。结果:D5s592位点的发生率最高,其LOH及MSI的发生率分别是40%和30%;其次是D3s1228,其MSI和LOH的发生率分别为40%和12.5%;D9s162位点LOH的发生率为42.5%,MSI为5%;阳性率最低的微卫星位点是D11s1758,突变率为20%。D5s592位点的LOH在T1期与T3、T4期之间的差异显著,且在Ⅱ级与Ⅲ级喉鳞癌中LOH改变有所不同;D3s1228位点在T1期与T3、T4期的MSI有显著差异,且MSI在Ⅰ级与Ⅲ级喉鳞癌中有所不同;D9s162位点在Ⅱ级与Ⅲ级鳞癌中LOH有明显差异。结论:D5s592、D3s1228和D9s162位点微卫星改变与喉鳞癌临床分期及病理分级有关。D5s592位点的LOH是喉鳞癌发生发展中的早期事件,并提示APC参与肿瘤的发生。D3s1228位点MSI多发生于喉鳞癌的晚期,但MSI阳性者肿瘤的恶性程度较低,MSI可能通过FHIT的失活参与致癌机制。D9s162位点微卫星改变以LOH为主,提示p16参与癌症的发生,Ⅱ级喉鳞癌LOH的发生率较低。D11s1758位点的微卫星改变与肿瘤的发生及发展并无明显相关性,但并不能排除此区域潜在抑癌基因的存在。
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