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EGb的主要有效成分包括类黄酮和萜内酯,其具有强大的抗氧化与清除自由基的能力,还具有抗炎、抗过敏、扩张血管、保护心脑血管等作用,已广泛应用于心脑血管疾病的防治。ASP是应用最为广泛的的抗炎药,它可以抑制血小板的释放反应,抑制血小板的聚集,临床上常用于预防心脑血管疾病的发作。在我国,临床上经常采用EGb联合ASP治疗心血管疾病,但是二者联合是否有协同作用,尚无一致结论,本文针对这一问题开展研究。本研究分2个部分进行:1.银杏叶提取物联合抗血小板药对血小板聚集的影响---Meta分析;2.银杏叶提取物联合阿司匹林对活化血小板诱导人冠状动脉内皮细胞ROS产生,NADPH氧化酶4和RhoA表达的影响。第1部分:抗血小板药和银杏叶提取物联合对血小板聚集的影响---Meta分析目的:比较抗血小板西药和银杏叶提取物联合与单用抗血小板药对血小板聚集影响。方法:用计算机在PubMed、Spring Ling、Biosis Previews、Cochrane和CNKI、 VIP、CBM数据库中检索截止到2013年3月收录的抗血小板西药和银杏叶提取物联合与抗血小板西药单独应用对血小板聚集率影响的随机对照试验,使用RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果:共纳入6篇RCT,共7项随机对照试验(抗血小板西药和银杏叶提取物联合应用作为实验组,抗血小板西药单独应用作为对照组)。Meta分析结果显示,实验组与对照组相比,对ADP诱导的血小板聚集率的影响有显著差异[MD=-6.41,95%Cl(-0.95,-3.78),P<0.00001];对胶原诱导的血小板聚集率的影响不明显,无统计学意义[MD=-0.56,95%CI(-3.91,2.80),P=0.74]。对出血时间的延长没有统计学意义[MD=0.39,95%CI(-0.09,0.86),P=0.11]。结论:抗血小板西药与银杏叶提取物联合应用对血小板聚集率的抑制作用是否有协同作用尚不确定,对出血时间的作用不显著。不明显,无统计学意义[MD=-0.56,95%CI(-3.91,2.80),P=0.74]。对出血时间的延长没有统计学意义[MD=0.39,95%CI(-0.09,0.86),P=0.11]。结论:抗血小板西药与银杏叶提取物联合应用对血小板聚集率的抑制作用是否有协同作用尚不确定,对出血时间的作用不显著。第2部分:银杏叶提取物联合阿司匹林对活化血小板诱导人冠状动脉内皮细胞ROS产生,NADPH氧化酶4和RhoA表达的影响目的:在本研究中,我们通过利用活化血小板诱导HCAECs,体外建立氧化应激模型。探讨不同剂量的EGb与ASP,尤其是两者联合能否通过抑制细胞内N0X4及Rh0A的表达从而达到抑制细胞内ROS的产生。方法:用2×108/ml的活化血小板刺激HCAECs12h后,将细胞随机分为4组:活化血小板组、ASP实验组、EGb实验组及联合组,另设一生理盐水对照组。实验组分别加入ASP(1、2和5mmol/L).EGb(4.40和400μg/ml)及两者联合(ASP 1mmol/l和EGb 40μg/ml)干预12h。用DCFH-DA探针检测细胞内ROS的产生、用荧光显微镜观察,用western-blot技术检测细胞内NOX4和RhoA的表达。结果:荧光显微镜观察结果显示:活化血小板刺激HCAECs后,ROS产生明显增加(p<0.05 vs.生理盐水对照组),ASP和EGb对ROS产生的抑制作用呈剂量相关性(p<0.05 vs.活化血小板组)并且ASP联合EGb对ROS的表达有协同抑制作用(p<0.05 vs.ASP组或EGb组)。Western-b1()t结果显示:活化血小板刺激HCAECs后,N0X4和RhoA的表达量增加(p<0.05 vs生理盐水对照组), ASP和EGb对N0X4表达的抑制作用呈剂量相关性(p<0.05 vs.活化血小板组),ASP和EGb对RhoA表达有抑制作用(p<0.05 vs.活化血小板组),但不呈剂量相关性,ASP联合EGb对NOX4和RhoA表达有协同抑制作用(p<0.05 vs.ASP组或EGb组)。结论:ASP和EGb均能抑制体外培养的活化血小板诱导的HCAECs内ROS、NOX4和RhoA的表达,并且两者联合应用对体外培养的活化血小板诱导的HCAECs内ROS、NOX4和RhoA的表达有协同抑制作用,由此我们可以推断:ASP和EGb联合治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的机制可能是通过协同抑制NOX4和RhoA的表达从而使ROS表达量减少抑制细胞内的氧化应激反应。