此文对天府肉鹅IFN-α(TFGoIFN-α)基因(GenBank登录号HQ115583)开展了以下系列研究:TFGoIFN-α基因克隆、TFGoIFN-α原核表达、重组蛋白复性、复性蛋白抗病毒活性的研究。　　 1.TFGoIFN-α基因克隆及生物信息学分析CoA诱导培养天府肉鹅外周血单核细胞,提取RNA,经过RT-PCR扩增得到天府肉鹅IFN-α基因片段,大小为648bp,构建pMD19-TFGoIFN-α克隆载体并测序。TFGoIFN-α基因含有一个576bp的ORF,191个氨基酸组成,分子量大小大约为21kDa,并且信号肽为前28个氨基酸组成,信号肽与成熟肽的切割位点在第28与29个氨基酸之间。　　 TFGoIFN-α是一个多G或C结尾密码子的基因,C3s(密码子第三位为C)的密码子占81.29％,偏爱程度很高。密码子偏爱性特征分析鹅IFN-α基因与鸭IFN-α基因偏爱特征相似,与鸡IFN-α基因有所不同。TFGoIFN-α基因密码子偏爱程度与Ecoli,酵母以及人类总密码子偏爱程度的比值比较,差值较大的E.Coli系统有47个,Yeast系统有46个,Human系统有45个。　　 2.TFGoIFN-α表达载体的表达根据信号肽位置设计一对引物,扩增成熟肽TFGoIFN-α片段,构建pMD19-mTFGoIFN-α,并送公司测序,将测序正确的pMD19-mTFGoIFN-α载体与pET-32a(+)双酶切构建表达载体pET-32-mTFGoIFN-α,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),采用IPTG诱导表达得到大小为38kDa的重组蛋白,主要以包涵体的形式存在,表达量较大,大约为6mg/mL。　　 3.重组表达蛋白TFGoIFN-α复性及其抗病毒活性的检测 TFGoIFN-α重组蛋白通过稀释透析以及Ni-IMAC亲和层析复性后,检测到抗VSV活性为104U/mL,比活性为5.5×103U/mg。并且在GEF和DEF中检测到天府肉鹅IFN-α重组蛋白抗VSV效果是一致的。复性后的鹅IFN-α重组蛋白进行抗GPV,IFN保护组以及GPV组病毒拷贝数之间存在显著性差异(P＜0.05),鹅IFN重组蛋白具有抗GPV的活性作用。在GEF中检测得到,对GPV病毒的相对抑制率高达89.4％。