副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，HPS)是一种无运动性，多形态革兰氏阴性杆状细菌，属于巴斯德氏菌科。该菌是革兰瑟氏病的致病因子，以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征；由于高发病率和死亡率，该病给全球的养猪业造成了巨大的经济损失。目前，人们对副猪嗜血杆菌的研究尚处于起始阶段，特别是分子水平的研究刚起步，公开报道的基因数不到20个。本研究旨在建立副猪嗜血杆菌血清5型地方株的基因组表达文库，为发掘副猪嗜血杆菌血清5型地方株新的功能基因奠定基础。选择我国流行优势菌株副猪嗜血杆菌血清5型地方株为研究对象，提取细菌基因组DNA，用限制性内切酶Sau3AⅠ对基因组DNA进行部分酶切，回收大小为1～5Kb的DNA片段，将其连接入原核表达载体pET-28a-c，最后转化宿主菌，结果成功地构建了基因表达文库，为后续的基因筛选工作奠定基础；另外，本研究选择嗜血杆菌属的流感嗜血杆菌为参考对象进行引物的设计，以副猪嗜血杆菌血清5型地方菌株的基因组DNA为模板，进行PCR扩增反应，结果表明成功地获得两个新基因：23S rRNA基因(存在于核糖体大亚基中的保守性基因)和腺苷酸环化酶基因(负责将腺嘌呤核苷三磷酸转变为环腺苷酸)，并进一步做了不同物种之间的分子系统发育分析，构建了基于23S rRNA基因的邻接法系统发育树，阐明了副猪嗜血杆菌与其它菌种的分子进化关系。