电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)广泛存在于各种真核生物中,是一类孔蛋白,通过电压的变化来调节物质的运输。前期本实验室已鉴定水稻基因组含8种vdac基因,并且研究得知OsVDAC3超表达的YTB植株相较于野生型对耐寒及耐盐性有一定的敏感性,同时得到了一批OsVDAC3超表达的YTB的种子。本实验期望通过对这批材料的鉴定,排除受到基因污染和分离的种子获得符合条件的阳性植株便于下一步的研究,同时对OsVDAC1进行了原核表达载体的构建,取得了如下结果:1.对得到的OsVDAC3超表达的YTB的种子进行培养,提取基因组DNA后筛选Hyg阳性的植株。在阳性植株筛选出不含Rf5和Rf6基因的植株。再通过OrfH79以及Orf216的鉴定来判断其受体是YTA还是YTB。经过筛选和复查,鉴定出了几十株符合条件的OsVDAC3转YTB植株,未鉴定出OsVDAC3转YTA植株。2.对OsVDAC1的生物信息学分析表明其ORF序列大小为825bp,编码274个氨基酸残基。从日本晴cDNA扩增得到OsVDAC1的ORF,成功构建了重组质粒pET-32a-OsVDAC1。SDS-PAGE及Western blot结果证实IPTG诱导OsVDAC1表达成功。