枸杞多糖分离纯化技术研究

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枸杞(Lycium chinense Miller),又名枸杞果、甘枸杞、地骨子、枸杞豆等,为多年生木本茄科植物枸杞的成熟果实。枸杞多糖是枸杞中的主要生物活性成分,具有能够提高细胞免疫功能、保护肝损伤、降低血糖水平、延缓衰老等多种药理作用。前人主要采用化学方法对枸杞多糖进行提取并进一步研究,然而对于采用物理手段提取枸杞多糖,并对其理化性质进行研究的报道尚不多见。本文以宁夏枸杞鲜果为原料,研究枸杞原浆的护色方法,考察果胶酶及复合酶酶解工艺对枸杞原浆出汁率及可溶性固形物含量的影响,并应用Box-Behnken响应面法对酶解工艺条件进行优化,确定最佳工艺参数;研究枸杞原汁的澄清、脱色、超滤与纯化方法,对纯化枸杞多糖进行理化性质研究与鉴定。实验结果如下:  1.枸杞鲜果水分含量为78.77g/100g,还原糖含量为13.30%,枸杞多糖含量为2.57g/100g,可溶性固形物含量为16.6%。  2.枸杞鲜果果汁的护色剂是维生素C,添加量为0.3%。  3.枸杞原浆的最佳酶解条件为:果胶酶添加量0.016%,温度40.5℃,酶解时间1.34h,最高出汁率为48.75%。使用复合酶的最佳条件为:复合酶添加量0.09%,酶解温度35.4℃,酶解时间2.74h,最高出汁率为49.20%,复合酶比单一果胶酶对提高枸杞鲜果出汁率效果更好。  4.枸杞果汁的最佳澄清方法为加热沉淀法,其效果优于采用添加澄清剂如:明胶、壳聚糖和单宁。加热澄清的最佳条件为温度80℃,时间20min。所得澄清枸杞汁的透光率达到69.87%、可溶性固形物13.8%、黏度4.4mPa.s。枸杞果汁的最佳脱色剂为粉末活性炭,条件为粒径300目,添加量0.03g/ml,常温,时间20min。  5.果汁前处理对多糖损失较大,其中复合酶酶解后枸杞汁中枸杞多糖含量为1.10g/100g,枸杞多糖保留率为42.66%;加热澄清后枸杞多糖含量为1.28g/100g,枸杞多糖保留率为49.95%;脱色后枸杞多糖含量为0.67g/100g,枸杞多糖保留率为25.95%。  6.对超滤后的截留液进行真空冷冻干燥,采用DEAE-纤维素进行分离纯化,分别采用蒸馏水、0.05mol/LNaCl、0.1mol/LNaCl、0.25mol/LNaCl、0.5mol/LNaCl洗脱,得到LBP-1、LBP-2、LBP-3、LBP-4、LBP-5共5种多糖组分,但是由于LBP-3、LBP-5含量太少,不做后续研究。
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