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目的与背景:
MicroRNAs(miRNAs)是广泛存在于真核生物中的，长约为19-24个核苷酸，非编码的一类单链小分子RNA。在个体发育、细胞增殖分化、凋亡、迁移侵袭、血管生成、肿瘤形成等过程具有重要的调控作用。MiRNAs通过与其靶基因的3UTR区不完全互补配对抑制靶基因的翻译，或者完全配对直接降解靶基因的mRNA。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，近年来发病率呈明显的上升趋势。已有报道证明MiRNA-155与乳腺癌的发生发展有着密切关系，但是它的具体作用机制仍未完全清楚。本研究将继续探讨miRNA-155在乳腺癌细胞中的功能和作用机制问题，希望为乳腺癌的诊断和治疗提供理论基础。
材料和方法:
(1)转染技术:采用脂质体Lipofectamine2000介导的转染技术，将miRNA-155mimics和miRNA-155 inhibitor转染入乳腺癌细胞MDA-MB-231中，并用Real-time PCR证实转染后前后miRNA-155的表达情况。
(2) MTS法:应用MTS法检测转染miRNA-155 mimics和miRNA-155 inhibitor后，乳腺癌细胞增殖能力的改变.
(3)平板克隆形成实验:将miRNA-155 mimics和miRNA-155 inhibitor转染到乳腺癌细胞中，连续培养7天，观察乳腺癌细胞克隆形成能力的改变;
(4) Transwell迁移试验和细胞划痕试验:观察转染miRNA-155 mimics和miRNA-155 inhibitor后的细胞迁移能力的改变。
(5) Real-time PCR测mRNA水平的表达:转染miRNA-155 mimics和miRNA-155inhibitor48h后用Real-time PCR检测mRNA水平的表达改变情况。
(6) Western blot:检测转染后靶蛋白SOCS1及迁移相关蛋白删P16表达水平的改变。
结果:
(1) Real-time PCR结果显示转染后水平:实验组转染miRNA-155 mimics的miRNA-155表达量较NC组明显增加，转染miRNA-155 inhibitor较对照组显著降低（P均＜0.05）。
(2) MTS法检测结果显示:实验组转染miRNA-155 mimics较NC组，增殖能力受到明显的增强，转染miRNA-155 inhibitor较对照组显著降低(P均＜0.05)。
(3)平板克隆实验结果显示:实验组转染miRNA-155 mimics较NC组，克隆形成能力显著增强，转染miRNA-155 inhibitor较对照组显著降低(P均＜0.05)
(4)细胞划痕实验显示:转染miRNA-155 mimics的乳腺癌细胞与转染NC的对照组细胞相比，其横向迁移能力受到显著增强，转染miRNA-155 inhibitor较对照组显著降低。
(5) Transwell移行实验结果显示:转染miRNA-155 mimics的乳腺癌细胞与转染NC的对照组细胞相比，其穿膜数受到显著增加，转染miRNA-155inhibitor较对照组显著降低（P均＜0.05）。
(6) mRNA水平检测结果显示:转染了miRNA-155 mimics的乳腺癌细胞与转染NC的对照组细胞相比，其MMP16的mRNA表达量增高，转染miRNA-155inhibitor较对照组显著降低（P均＜0.05）。
(7) Western blot结果显示:乳腺癌细胞MDA-MB-231在转染miRNA-155 mimics后，其靶蛋白SOCS1表达水平被显著下调，迁移相关蛋白MMP16上调。而转染了miRNA-155 inhibitor后，SOCS1蛋白表达水平上调，MMP16下调。
结论:
结果显示miRNA-155对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖能力和迁移能力显著增强;于是我们认为miRNA-155在乳腺癌细胞中可能起到肿瘤致癌基因的作用。初步认为其miRNA-155通过作用于抑制靶基因SOCS1在肿瘤细胞增殖和迁移中发挥重要作用，同时可能间接通过增加MMP16促进细胞迁移能力。