目的：采用液质联用技术（High performance liquid chromatography tandem massspectrometry, LC-MS/MS），建立卡泊三醇分析方法；考察卡泊三醇的稳定性，以确保体外释放过程中卡泊三醇的测定结果真实可靠；以卡泊三醇软膏为模型药物，考察不同动物皮肤（猪、大鼠、小鼠）以及动物不同部位皮肤（猪背部皮、猪腹部皮、猪耳部皮）渗透性能差异。研究方法：采用液液萃取法，以正己烷-二氯甲烷-异丙醇（300:150:15，v/v/v）为提取试剂，选用Agilent Extend-C18柱（4.6×150mm I.D.，5μm粒径），流动相为甲醇-0.1%氨水（80:20，v/v），流速为1.0mL/min，柱温为40°С，取30μL进入质谱分析。质谱分析采用电喷雾离子化源（ESI），负离子模式检测，在多重反应监测（MRM）模式下，卡泊三醇与内标洛伐他汀用于定量分析的离子反应分别为m/z411.1→m/z393.5及m/z403.2→m/z101.2。根据国家食品药品监督管理局有关规定，对分析方法进行了全面的方法确证，考察定量分析卡泊三醇的LC-MS/MS方法的专属性、线性范围、最低定量下限、精密度、准确度、提取回收率、基质效应及稳定性等。考察卡泊三醇于三种不同基质（离体皮肤匀浆液、接收液和软膏）中置于光照、室温避光以及37oC避光条件下的稳定性，以确保在透皮研究过程中不会因为环境因素导致卡泊三醇的降解而致使测定结果的误差。采用RYJ-6B型药物透皮扩散试验仪，PBS：乙醇=7:3（v/v）为接收液，猪背部皮、猪腹部皮、猪耳部皮、大鼠背部皮及小鼠背部皮为离体皮肤模型，卡泊三醇软膏为模型药物，考察不同时间点卡泊三醇于不同动物皮肤中的渗透情况。结果：本研究建立了卡泊三醇的LC-MS/MS分析方法。三种基质在各自的线性范围内（皮肤匀浆液：1-300ng/mL；接收液：0.5-100ng/mL；软膏样品：40-1200ng/mL）均表现出良好的线性，线性相关系数均大于0.996。最低定量下限：皮肤匀浆液为1ng/mL，接收液为0.5ng/mL，软膏样品为40ng/mL，满足测定要求。准确度、日内精密度和日间精密度均在±15%之内。提取回收率较高且稳定，基质效应不影响卡泊三醇及内标洛伐他汀的测定。稳定性研究结果表明卡泊三醇三种基质样品室温放置4h、提取后室温放置4h、-80°C冰冻放置15天以及反复冻融三次均稳定。以上研究结果表明，本方法具有快速、专属、准确、灵敏度高的特点，适用于卡泊三醇软膏皮肤渗透性研究。三种基质中的卡泊三醇置于光照条件下7h均发生了明显的降解。避光条件放置7h则没有明显的降解发生。三种基质中的卡泊三醇置于37oC避光放置24h稳定。该研究结果提示，卡泊三醇的透皮研究应置于避光条件下，且可以满足透皮研究中需保持37oC这一条件。卡泊三醇软膏给药24h后，接收液中卡泊三醇的含量：猪背部皮肤＜大鼠背部皮肤＜猪腹部皮肤＜猪耳部皮肤＜小鼠背部皮肤。不同时间点猪的三个部位皮肤含药量相似（p＞0.05），在20h内的所有时间点，卡泊三醇在大鼠和小鼠背部皮肤中的累积含量明显高于猪皮。在所有采样时间点，大鼠、小鼠背部皮肤表面软膏中卡泊三醇残留量均低于猪皮。透皮研究过程中总的药物含量（接收液、皮肤、软膏中卡泊三醇的量之和）在3h后快速降低至给药剂量的80%，然后保持该水平直到24h。该现象可以说明卡泊三醇在渗透进入皮肤的过程中同时伴随着代谢，但是皮肤中酶的含量与代谢活力均较低。研究结果表明，随着皮肤厚度的增加，透过皮肤的药物量减少。由此可见，皮肤厚度是影响卡泊三醇渗透的关键因素，而皮肤的组织特征则对此影响不显著。卡泊三醇于不同皮肤中残留情况的差异主要取决于皮肤的组织形态学特征。