【摘 要】
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鱼腥藻是一种光能无机自养型原核生物,并能固氮,本身不含有大肠杆菌所含有的毒蛋白,有望成为基因工程中的新型宿主.该论文研究了转TNF基因鱼腥藻生长和外源基因表 达的条件,
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鱼腥藻是一种光能无机自养型原核生物,并能固氮,本身不含有大肠杆菌所含有的毒蛋白,有望成为基因工程中的新型宿主.该论文研究了转TNF基因鱼腥藻生长和外源基因表 达的条件,以达到提高产量的目的.在研究中发现:转TNF基因鱼腥藻的最适接咱量为5﹪,最适pH值为78,最适温度为25-30℃;而添加氮源(NaNO<,3>)和有机碳源(蔗糖)可以有效地 提高最终生物量和平均比生长速率,NaNO<,3>和蔗糖的最适添加量分别为3g/L和9g/;在添 加碳氮源之后,光照依然是必须的,光强最佳值为960-1500Lux;各无机盐的最适浓度分别 为K<,2>HPO<,3>·3H<,2>O 40mg/L、CaCl<,2> 40.5mg/L、MgSO<,4>·7H<,2>O 75mg/L、柠 檬酸铁铵6mg/L,微量元素溶液最适添加量为1ml/L.结果最终生物量和平均比生长速率分别达到1.327g/L和0.38天<-1>,分别提高了272﹪和33.3﹪,在些同时细胞中的TNF基因仍能 有效表达.该研究还建立了对TNF的毛细管电泳定量方法,该方法比SDSPAGE具有更高的分辨率以及更简单的操作.总之,以鱼腥藻为宿主表达TNF基因是一项新的尝试,该论文通过外 部条件的优化,有效地提高了转TNF基因鱼腥藻的生物量,并能维持一定的表达能力,为进 一步的研究打下了基础.
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